本書是大學(xué)本科制藥分離工程配套實(shí)驗(yàn)教材。根據(jù)制藥分離工程課程實(shí)踐的需要,選擇較成熟的、在基本操作和過(guò)程類型等方面具有代表性的實(shí)驗(yàn)。如萃取分離、沉淀分離、吸附及色譜分離純化,生物藥物和天然藥物的提取、分離純化等實(shí)驗(yàn)等。通過(guò)本教材可著重鍛煉學(xué)生在制藥上游技術(shù),即制藥分離技術(shù)中的各種實(shí)踐技能和動(dòng)手能力。同時(shí),本教材還可以作為教師、制藥及相關(guān)企業(yè)員工的輔助資料使用。
前言
制藥分離工程實(shí)驗(yàn)是制藥工程專業(yè)重要的實(shí)驗(yàn)課程,也是制藥分離工程理論課程的配套實(shí)驗(yàn)。制藥分離工程可視為制藥的下游加工過(guò)程,無(wú)論是化學(xué)合成、生物技術(shù)制備或中藥提取而獲得的上游原料藥,都必須通過(guò)提取、濃縮、除雜和純化等分離步驟才能實(shí)現(xiàn)藥物的產(chǎn)品化。因此,制藥分離工程是制藥技術(shù)轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力不可缺少的重要環(huán)節(jié)。
通過(guò)制藥分離工程實(shí)驗(yàn),可將課程理論與實(shí)踐訓(xùn)練有機(jī)地結(jié)合起來(lái),使學(xué)生能充分體會(huì)和理解分離工程在制藥過(guò)程中的重要性和意義,理解藥品質(zhì)量及其控制與制藥分離技術(shù)之間的關(guān)系,同時(shí)掌握制藥分離工程的技術(shù)方法、操作技能等知識(shí)環(huán)節(jié)。
本教材根據(jù)教學(xué)大綱的要求,結(jié)合我校制藥工程專業(yè)多年的教學(xué)實(shí)踐,并吸取其他兄弟院校相關(guān)實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)編寫而成。本書共分兩部分、五章,其中基礎(chǔ)理論部分包括兩章,實(shí)驗(yàn)部分按照藥物的來(lái)源又分為化學(xué)制藥分離工程實(shí)驗(yàn)、生物制藥分離工程實(shí)驗(yàn)和中藥制藥分離工程實(shí)驗(yàn)三章,共收錄實(shí)驗(yàn)47個(gè)。書中編寫的實(shí)驗(yàn)比實(shí)際教學(xué)課時(shí)能完成的實(shí)驗(yàn)多,因各專業(yè)方向、各校的情況不同,這樣做的目的是使本書可選用范圍更寬,選用本書的院校可根據(jù)實(shí)際情況選擇相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行教學(xué)。
本書編者由多年從事制藥工程理論教學(xué)和實(shí)驗(yàn)教學(xué)的老師組成。由李再新任主編,其他編者包括趙海、羅容珍、張智、江海霞等。各位編者在編寫和修訂過(guò)程中付出了辛勤的勞動(dòng),在此一并表示感謝!本書的出版得到了四川理工學(xué)院教材出版項(xiàng)目的資助,在此表示衷心的感謝!
由于編寫時(shí)間、編者水平等有限,書中存在的錯(cuò)誤和疏漏之處懇請(qǐng)專家和讀者批評(píng)指正。
編者
2015年10月
李再新,四川理工學(xué)院教師,工學(xué)博士,教授,制藥工程專業(yè)碩士生導(dǎo)師,制藥工程系副主任。主要承擔(dān)課程制藥工藝學(xué)、生物化學(xué)、分離工程等。主要研究方向制藥工程、微生物代謝與新藥篩選。主持省廳級(jí)科研課題11項(xiàng),參與3項(xiàng)國(guó)家科研重大課題,發(fā)表論文36篇,申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利6項(xiàng),授權(quán)專利4項(xiàng)。
第一部分 基礎(chǔ)理論
第一章 緒 論 3
第二章 制藥分離工程實(shí)驗(yàn)基本知識(shí) 5
第一節(jié) 制藥分離過(guò)程的基本原理 5
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù) 11
第二部分 實(shí)驗(yàn)部分
第三章 化學(xué)制藥分離工程實(shí)驗(yàn) 15
實(shí)驗(yàn)1 從茶葉中提取咖啡堿 15
實(shí)驗(yàn)2 苯甲酸的萃取分離 17
實(shí)驗(yàn)3 超臨界二氧化碳流體萃取植物油 19
實(shí)驗(yàn)4 雙水相萃取技術(shù)—雙水相系統(tǒng)制備 22
實(shí)驗(yàn)5 重結(jié)晶及過(guò)濾 24
實(shí)驗(yàn)6 簡(jiǎn)單蒸餾及分餾 27
實(shí)驗(yàn)7 膜分離 31
實(shí)驗(yàn)8 吸附實(shí)驗(yàn) 37
實(shí)驗(yàn)9 薄層色譜法分離復(fù)方新諾明中SMZ及TMP 40
實(shí)驗(yàn)10 葡萄糖酸鋅的制備 42
實(shí)驗(yàn)11 快速柱色譜 44
實(shí)驗(yàn)12 離子交換及交換容量的測(cè)定 46
實(shí)驗(yàn)13 丙戊酸鈉的合成及產(chǎn)物的分離(設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)) 48
實(shí)驗(yàn)14 阿司匹林合成過(guò)程中間體及產(chǎn)物的分離(設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)) 49
第四章 生物制藥分離工程實(shí)驗(yàn) 50
實(shí)驗(yàn)1 豬胰蛋白酶的純化及其活性測(cè)定 50
實(shí)驗(yàn)2 胰彈性蛋白酶的制備及活力測(cè)定 54
實(shí)驗(yàn)3 殼聚糖-戊二醛交聯(lián)吸附法固定胰蛋白酶 57
實(shí)驗(yàn)4 親和層析法制取胰蛋白酶抑制劑 61
實(shí)驗(yàn)5 SDS-PAGE蛋白質(zhì)電泳和蛋白質(zhì)印跡檢測(cè) 65
實(shí)驗(yàn)6 堿裂解法制備質(zhì)粒DNA 69
實(shí)驗(yàn)7 基因工程菌感受態(tài)細(xì)胞的制備、DNA片段連接及轉(zhuǎn)化 75
實(shí)驗(yàn)8 重組克隆的篩選、PCR鑒定與瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) 78
實(shí)驗(yàn)9 重組蛋白類藥物的表達(dá)、制備及分析(設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)) 81
實(shí)驗(yàn)10 水稀釋-鹽析法制備雞免疫球蛋白(卵黃抗體,IgY) 86
實(shí)驗(yàn)11 酸醇提取法制備豬胰島素 89
實(shí)驗(yàn)12 超濾法制備胸腺肽 92
實(shí)驗(yàn)13 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)實(shí)驗(yàn) 94
實(shí)驗(yàn)14 氯化血紅素的制備及含量測(cè)定 97
實(shí)驗(yàn)15 維生素B2(核黃素)的制備 99
實(shí)驗(yàn)16 銀耳多糖的制備及分析 101
第五章 中藥制藥分離工程實(shí)驗(yàn) 104
實(shí)驗(yàn)1 浸漬法提取鹽酸小檗堿 104
實(shí)驗(yàn)2 連續(xù)回流法提取白芷中的香豆素 106
實(shí)驗(yàn)3 pH?梯度萃取分離大黃中蒽醌類成分 108
實(shí)驗(yàn)4 水蒸氣蒸餾法提取八角茴香油 111
實(shí)驗(yàn)5 大黃中蒽醌類化合物的超臨界CO2萃取及鑒別 114
實(shí)驗(yàn)6 有機(jī)溶劑沉淀法制備大豆脲酶 117
實(shí)驗(yàn)7 離子交換法分離純化苦參生物堿 119
實(shí)驗(yàn)8 薄層色譜法分離辣椒紅色素 121
實(shí)驗(yàn)9 大孔樹脂柱色譜分離純化白頭翁皂苷 124
實(shí)驗(yàn)10 柱層析法對(duì)色素的提取與分離 126
實(shí)驗(yàn)11 大棗中多糖的提取分離 128
實(shí)驗(yàn)12 槐花米中蕓香苷的提取及槲皮素的制備與檢識(shí) 130
實(shí)驗(yàn)13 薯蕷皂苷元的提取精制 133
實(shí)驗(yàn)14 果膠的提取分離及精制 136
實(shí)驗(yàn)15 黃連中小檗堿的提取和鑒定(設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)) 138
實(shí)驗(yàn)16 茶葉中茶多酚的提。ㄔO(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)) 140
實(shí)驗(yàn)17 不同方法分離純化山楂提取物中總黃酮(設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)) 141
附 錄 143
附錄A 化學(xué)試劑的種類和分級(jí) 143
附錄B 常用有機(jī)溶劑的物理常數(shù) 144
附錄C 常用緩沖溶液的配制 146
參考文獻(xiàn) 151