生命是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,“DNA-RNA-蛋白質(zhì)”這一中心法則不能解釋所有生命現(xiàn)象。表觀遺傳學(xué)是在這些例外的基礎(chǔ)之上發(fā)展而成的,是基于非基因序列改變所致基因表達(dá)水平變化,如DNA甲基化和染色質(zhì)重塑等。表觀遺傳學(xué)已經(jīng)部分顛覆了我們對(duì)生物結(jié)構(gòu)和行為方式的理解!侗碛^遺傳學(xué)技術(shù)前沿》共分為七篇,主要內(nèi)容涵蓋DNA甲基化、組蛋自修飾、miRNA調(diào)控研究前沿和實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在主要闡述了表觀遺傳學(xué)的基本知識(shí)的基礎(chǔ)上,結(jié)合本領(lǐng)域國(guó)內(nèi)外新科研成果,系統(tǒng)總結(jié)介紹了當(dāng)前表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域的前沿進(jìn)展和新研究方法。
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目錄
第一篇表觀遺傳學(xué)概述及分析方法
第一章表觀遺傳學(xué)概述1
第二章DNA甲基化分析方法8
第三章組蛋白修飾分析方法15
第四章非編碼RNA相關(guān)分析方法19
第二篇基因表達(dá)檢測(cè)
第五章基因表達(dá)檢測(cè)概述26
第六章基因表達(dá)檢測(cè)方法27
第一節(jié)RT-PCR技術(shù)27
第二節(jié)熒光定量PCR技術(shù)29
第三節(jié)原位雜交技術(shù)35
第四節(jié)定點(diǎn)突變技術(shù)41
第五節(jié)基因芯片43
第六節(jié)啟動(dòng)子區(qū)活性分析50
第三篇miRNA檢測(cè)技術(shù)
第七章miRNA概述52
第八章miRNA檢測(cè)技術(shù)概述56
第一節(jié)生物信息學(xué)56
第二節(jié)miRNA芯片技術(shù)59
第三節(jié)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)miRNA62
第四節(jié)熒光素酶活性檢測(cè)技術(shù)68
第九章miRNA分析的應(yīng)用70
第四篇蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)
第十章蛋白檢測(cè)概述82
第十一章蛋白檢測(cè)技術(shù)概要87
第一節(jié)蛋白芯片技術(shù)87
第二節(jié)蛋白印跡技術(shù)91
第三節(jié)免疫熒光技術(shù)95
第四節(jié)免疫組化技術(shù)100
第五節(jié)ELISA技術(shù)103
第六節(jié)激光共聚焦技術(shù)115
第五篇DNA甲基化與組蛋白修飾檢測(cè)
第十二章DNA甲基化與組蛋白修飾概述119
第十三章DNA甲基化與組蛋白修飾方法概述136
第一節(jié)生物信息學(xué)分析136
第二節(jié)DNA甲基化檢測(cè)——MSP法138
第三節(jié)DNA甲基化檢測(cè)——焦磷酸測(cè)序法141
第四節(jié)DNA甲基化檢測(cè)——DNA甲基化芯片技術(shù)145
第五節(jié)DNA甲基化檢測(cè)——質(zhì)譜技術(shù)147
第六節(jié)組蛋白甲基化檢測(cè)150
第七節(jié)組蛋白乙;瘷z測(cè)155
第八節(jié)組蛋白糖基化檢測(cè)158
第九節(jié)組蛋白泛素化檢測(cè)162
第十節(jié)組蛋白甲基化和組蛋白乙酰化位點(diǎn)特異性分析163
第六篇基因與蛋白相互作用檢測(cè)
第十四章基因與蛋白相互作用檢測(cè)概述166
第十五章基因與蛋白相互作用檢測(cè)方法概述167
第一節(jié)生物信息學(xué)時(shí)代167
第二節(jié)ChIP技術(shù)172
第三節(jié)DNaseⅠ足跡實(shí)驗(yàn)180
第四節(jié)甲基化干擾試驗(yàn)181
第五節(jié)電泳遷移率變動(dòng)實(shí)驗(yàn)182
第六節(jié)Southern印跡雜交185
第七節(jié)表面等離子共振189
第八節(jié)酵母單雜交系統(tǒng)194
第九節(jié)噬菌體展示技術(shù)198
第十節(jié)核酸適體技術(shù)207
第十一節(jié)拉下實(shí)驗(yàn)219
第七篇蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用
第十六章蛋白與蛋白相互作用概述221
第十七章蛋白與蛋白相互作用檢測(cè)方法概述229
第一節(jié)生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)237
第二節(jié)染色質(zhì)免疫共沉淀242
第三節(jié)印跡疊加或Far-Western印跡245
第四節(jié)GST融合蛋白純化技術(shù)245
第五節(jié)羥基蛋白質(zhì)足跡法249
第六節(jié)細(xì)菌雙雜交系統(tǒng)252
第七節(jié)酵母雙雜交技術(shù)255
第十八章蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用應(yīng)用259
參考文獻(xiàn)260