本書根據(jù)高等農(nóng)林院校實際和多年教學實踐編寫而成。實驗內(nèi)容分為基礎性實驗、綜合性實驗和研究性實驗三部分;A性實驗精選14個實驗,涉及植物生理學基本知識和實驗技能;6個綜合性實驗涵蓋植物水分生理、礦質(zhì)營養(yǎng)、光合和呼吸作用以及生長發(fā)育生理,每個實驗均由多種實驗手段和技術組成;研究性實驗擬定了5個研究方向,使用單位可根據(jù)本校實際選做。本書可作為高等農(nóng)林院校的生物、農(nóng)學、園藝、環(huán)境等專業(yè)本、?粕褂,也可作為相關專業(yè)研究生、教師和科研人員的參考書。
植物生理學是研究植物生命活動規(guī)律和機制的一門實驗科學,是生物科學類、植物生產(chǎn)類相關專業(yè)的核心專業(yè)基礎課程,植物生理學實驗是該課程重要的實踐性教學環(huán)節(jié)。通過實驗使學生掌握植物生理學的基本測定方法和技術,培養(yǎng)學生的科學研究思維,提高學生分析問題和解決問題的能力,為今后從事科學研究奠定基礎。
本教材根據(jù)植物生理學實驗課程特點和對本科生能力培養(yǎng)要求,分為3章。第一章為實驗基本知識和技能,目的是使學生系統(tǒng)學習和掌握實驗材料的培養(yǎng)、采集、處理和保存,實驗基本操作,實驗記錄與數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,實驗報告和實驗論文撰寫的基本要求,以及實驗室安全與防范的基本知識。第二章是圍繞植物生理學的主要內(nèi)容,包括水分生理、營養(yǎng)生理、光合作用、呼吸作用和逆境生理等介紹常用的實驗方法,使學生較全面地掌握重要的實驗技術和原理。第三章是根據(jù)植物生理學的主要研究領域,設計了綜合性和研究性實驗案例,通過解析科研思路,引導學生綜合運用所學的理論知識,依據(jù)實驗目標,制訂實驗方案和技術路線等,培養(yǎng)學生的科研思維能力和素質(zhì)。本教材附錄中介紹了常見培養(yǎng)基和緩沖液的配制,生物學常用的數(shù)據(jù)庫。本教材配套數(shù)字課程的資源與實驗體系一體化設計,包括教學課件、實驗操作視頻、實驗結(jié)果彩圖、拓展文獻等,有助于學生提前預習和課后復習,全面掌握植物生理學實驗方法在科學研究中的應用,拓展學生的視野,提升其科研能力。
本教材注重理論聯(lián)系實際,著重加強學生規(guī)范操作、分析問題和解決問題能力的培養(yǎng),既滿足了農(nóng)林、生物類本科專業(yè)植物生理學實驗教學的需要,也可作為本科生、研究生畢業(yè)論文實驗及相關科研人員科學研究的參考書。
本教材由青島農(nóng)業(yè)大學的劉新、劉洪慶、車永梅、柏素花、楊德翠、馬倩、趙方貴、侯麗霞、張英昊和張艷萍,山東大學的張偉,山東農(nóng)業(yè)大學的王秀玲負責編寫完成。劉新和劉洪慶負責全書的審核;車永梅、柏素花和楊德翠負責數(shù)字課程資源的設計和審訂。全部編寫人員均具有多年從事植物生理學實驗教學和研究的實踐經(jīng)驗,曾經(jīng)多次編寫此類教材。
鑒于編者的水平有限,編寫時間較倉促,本書難免有不足之處,敬請讀者和專家指正。
編者
2017年3月20日
第一章 實驗基本知識和技能
第一節(jié) 實驗材料的培養(yǎng)方法
一、溶液培養(yǎng)法
二、培養(yǎng)基培養(yǎng)法
三、土壤培養(yǎng)法
第二節(jié) 實驗材料的采集、處理與保存
一、植物材料的采集
二、樣品的處理和保存
第三節(jié) 實驗的基本操作
一、玻璃器皿的洗滌
二、移液管和移液器的使用
三、溶液的配制和混勻
第四節(jié) 實驗記錄與數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
一、實驗記錄
二、實驗圖表的制作
三、實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析
第五節(jié) 實驗報告和實驗論文
一、實驗報告的內(nèi)容與要求
二、實驗論文的內(nèi)容與要求
第六節(jié) 實驗室火災防范
一、實驗室火災的預防
二、實驗室安全消防措施
第二章 基礎性實驗
第一節(jié) 植物水分生理相關指標的測定
實驗1 植物組織含水量及水分飽和虧的測定
實驗2 植物組織中自由水和束縛水含量的測定
實驗3 氣孔運動的影響因子及其信號轉(zhuǎn)導機制
I 光照、Co2對氣孔運動的影響
Ⅱ K+對氣孔開度的影響
Ⅲ ABA等植物激素對氣孔關閉的作用
Ⅳ ca2+參與ABA誘導氣孔關閉的信號轉(zhuǎn)導
實驗4 植物組織水勢的測定
I 小液流法、折射儀法
Ⅱ 露點法
第二節(jié) 植物營養(yǎng)生理相關指標的測定
實驗5 植物溶液培養(yǎng)和缺素培養(yǎng)
實驗6 根系活力的測定(TTC法)
實驗7 硝酸還原酶活性的測定
實驗8 谷氨酰胺合成酶活性的測定
實驗9 原子吸收光譜法測定植物體心含量
第三節(jié) 植物光合和呼吸作用相關指標的測定
實驗10 葉綠體色素的提取、分離、理化性質(zhì)和定量測定
I 葉綠體色素的提取、分離及理化性質(zhì)
Ⅱ 葉綠體色素的定量測定
實驗11 紅外線CO2氣體分析儀法測定植物光合速率與呼吸速率
實驗12 葉綠素熒光分析技術
實驗13 光合作用相關酶活性的測定
I 磷酸烯醇丙酮酸羧化酶活性的測定
Ⅱ 1,5一二磷酸核酮糖羧化酶活性的測定
實驗14 多酚氧化酶活性的測定
第四節(jié) 植物生長發(fā)育相關指標的測定
實驗15 花粉活力測定
I 花粉萌發(fā)法
Ⅱ TTC法
Ⅲ I2一KI染色法
實驗16 種子萌發(fā)和活力測定
I TTC法
Ⅱ 染料染色法
實驗17 種子萌發(fā)時淀粉酶活性的測定
實驗18 植物組織培養(yǎng)技術
I 植物組織培養(yǎng)的一般技術
Ⅱ 煙草葉組織培養(yǎng)中的形態(tài)發(fā)生和器官形成
實驗19 植物激素含量的測定(ELTsA法)
第五節(jié) 植物抗逆相關生理指標的測定
實驗20 植物組織可溶性糖含量的測定
I 蒽酮法
Ⅱ 苯酚法
實驗21 維生素c含量的測定
實驗22 電導法測定植物細胞膜透性
實驗23 超氧化物歧化酶活性的測定
實驗24 植物組織過氧化物酶活性的測定
實驗25 苯丙氨酸氨裂合酶活性的測定
實驗26 幾丁質(zhì)酶活性的測定
實驗27 B-1,3一葡聚糖酶活性的測定
實驗28 植物體內(nèi)游離脯氨酸含量的測定
實驗29 植物組織中丙二醛含量的測定
實驗30 植物組織中氧自由基含量的測定
第三章 綜合性和研究性實驗案例
案例1 eATP介導H2s誘導的擬南芥氣孔關閉過程
案例2 鹽脅迫對葡萄光合特性和熒光參數(shù)的影響
案例3 油菜素內(nèi)酯提高番茄幼苗抗冷性的作用機制
案例4 泡囊叢枝菌根真菌通過誘導IAA信號促進植物生長
案例5 鹽脅迫下紫花苜蓿幼苗某些生理指標的變化
案例6 蘋果異分支酸合酶基因MdICSI的克隆與抗病性分析
附錄
一、植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基成分組成
二、常用激素及生長調(diào)節(jié) 物質(zhì)
三、常用緩沖液的配制
四、生物學常用數(shù)據(jù)庫