第一章 基因工程制藥概論1
第一節(jié) 基因工程制藥的發(fā)展歷史1
一、傳統(tǒng)的生物制藥技術是現(xiàn)代生物制藥的基礎1
二、基因工程制藥是現(xiàn)代生物技術制藥發(fā)展的核心2
三、基因工程制藥的現(xiàn)狀及前景3
第二節(jié) 基因工程藥品的研發(fā)過程4
一、基因工程藥品的實驗室研究階段5
二、基因工程藥品的開發(fā)階段5
三、基因工程藥品的臨床實驗6
參考文獻7

第二章 基因工程制藥9
第一節(jié) 制藥基因的克隆9
一、制藥基因的獲得9
二、制藥基因與載體分子的體外連接反應15
三、將人工重組DNA分子導入到能夠正常復制的宿主細胞中23
四、重組子的鑒定和篩選24
第二節(jié) 重組蛋白表達系統(tǒng)25
一、原核表達系統(tǒng)25
二、酵母表達系統(tǒng)28
三、昆蟲細胞表達系統(tǒng)31
四、哺乳動物細胞表達系統(tǒng)33
五、轉(zhuǎn)基因植物表達系統(tǒng)37
六、轉(zhuǎn)基因動物表達系統(tǒng)40
七、表達系統(tǒng)的選擇43
第三節(jié) 蛋白的分離純化43
一、蛋白樣品的前期處理44
二、蛋白分離純化主要方法44
三、包涵體的分離純化53
四、抗體的分離純化56
第四節(jié) 轉(zhuǎn)染技術58
一、轉(zhuǎn)染方法58
二、優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件63
三、報告基因63
第五節(jié) 融合標簽65
一、融合標簽的特征及分類65
二、融合標簽各論65
第六節(jié) 已投入市場的基因工程藥物70
一、治療用激素70
二、干擾素77
三、造血因子和凝血因子81
四、白細胞介素85
五、最新投入市場的藥物86
參考文獻87

第三章 抗體工程制藥88
第一節(jié) 抗體88
一、抗原、抗體的概念及抗原抗體的關系88
二、抗體的分子結(jié)構(gòu)、功能及其酶解片段88
三、免疫球蛋白基因的結(jié)構(gòu)和抗體多樣性96
第二節(jié) 單克隆抗體100
一、單克隆抗體產(chǎn)生的基本原理100
二、單克隆抗體的應用101
第三節(jié) 基因工程抗體102
一、基因工程抗體的特點102
二、基因工程抗體的應用102
第四節(jié) 抗體的氨基酸順序105
第五節(jié) 抗體分子的克隆108
一、抗體基因克隆的方法108
二、抗體基因克隆中的重要技術環(huán)節(jié)110
三、嵌合抗體113
四、改形抗體115
五、表面氨基酸殘基的“人源化”——鑲面抗體119
六、表位印跡選擇119
七、單鏈抗體120
八、雙特異性及多特異性抗體123
九、小分子抗體127
第六節(jié) 篩選抗體克隆的展示技術129
一、噬菌體展示技術129
二、酵母表面展示系統(tǒng)132
三、核糖體展示技術134
四、細菌表面展示技術136
五、噬斑印跡138
六、質(zhì)粒展示技術138
第七節(jié) 抗體親和力的優(yōu)化140
一、鼠源及其嵌合抗體的人源化140
二、通過改進親和力來增加抗體的功效140
三、通過選擇性的改進結(jié)合速率常數(shù)增加抗體功效141
四、構(gòu)建廣譜抗體141
第八節(jié) 抗體藥物142
一、概述142
二、FDA已批準的部分抗體(按時間順序排列)143
參考文獻150

第四章 基因工程藥物設計與研制方法151
第一節(jié) 重組蛋白藥物的復制151
一、復制生物技術藥品的一般技術流程152
二、復制重組蛋白藥品存在的問題152
第二節(jié) 通過對現(xiàn)有藥物的優(yōu)化和改造研發(fā)新藥154
一、定向突變155
二、定點突變160
三、糖基化工程與新藥研究166
第三節(jié) 創(chuàng)新藥物設計167
一、通過篩選同源基因的方法發(fā)現(xiàn)新的藥物基因或藥物靶基因168
二、通過RNA的表達譜篩選新的藥物基因和靶基因168
三、蛋白組學168
四、使用寡核苷酸技術證實藥物分子169
五、基因功能的系統(tǒng)分析169
六、使用生物模型發(fā)現(xiàn)新藥170
七、新藥開發(fā)的展望171
參考文獻171

第五章 基因工程疫苗173
第一節(jié) 疫苗的概述173
一、疫苗發(fā)展簡史173
二、疫苗的種類174
三、疫苗基本成分和性質(zhì)174
四、疫苗免疫途徑175
第二節(jié) 傳統(tǒng)疫苗及其研發(fā)原則176
一、滅活疫苗176
二、弱毒疫苗178
第三節(jié) 基因工程疫苗及其研發(fā)原則180
一、合成多肽疫苗及其研發(fā)原則180
二、亞單位疫苗及其研發(fā)原則181
三、基因缺失疫苗及其研發(fā)原則182
四、重組活載體疫苗及其研發(fā)原則183
五、核酸疫苗及其研發(fā)原則187
第四節(jié) 其他疫苗190
一、T細胞疫苗190
二、樹突狀細胞疫苗191
三、腫瘤疫苗194
四、避孕疫苗195
第五節(jié) 免疫佐劑196
一、免疫佐劑的定義和特點196
二、佐劑的種類197
參考文獻201