同濟博士論叢——擬南芥中RNA指導(dǎo)的DNA甲基化
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DNA甲基化是一個保守的表觀機理，在維持基因組穩(wěn)定和器官發(fā)育方面起到非常重要的作用。 《擬南芥中RNA指導(dǎo)的DNA甲基化/同濟博士論叢》通過實驗得到了部分?jǐn)?shù)據(jù)，通過篩選rosl的抑制子，確定了RDM1、RDM3、RDM4是RdDM受體復(fù)合體中的新成員，在連接與沉默復(fù)合體相關(guān)聯(lián)的小RNA功能與先前存在或者重新胞嘧啶甲基化中起到至關(guān)重要的作用。
總序論叢前言前言章 緒論1．1 RNA指導(dǎo)的DNA甲基化1．2 siRNA的產(chǎn)生1．3 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1．3．1 MET11．3．2 CMT31．3．3 重新甲基化酶DRM及不對稱甲基化1．3．4 DNA甲基化復(fù)合體第2章 材料與方法2．1 實驗材料2．2 方法2．2．1 植物總DNA的提取（CTAB法）2．2．2 植物總RNA提�。≧Neasy Plant Mini Kit， QIAGEN）2．2．3 cDNA合成（SuperScript．ⅢFirst-Strand Synthesis System， Invitrogen）2．2．4 感受態(tài)的制備與轉(zhuǎn)化2．2．5 DNA的回收（離心柱型普通瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒QIAGEN）2．2．6 RNA分析2．2．7 DNA甲基化分析2．2．8 6xHis-tagged蛋白質(zhì)純化（Ni - NTA Fast Start Kit，QIAGEN）2．2．9 位點突變（QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kit， Stratagene）2．2．10 凝膠阻滯分析（Electrophoretic mobility shift assay，EMSA）2．2．11 免疫共沉淀2．2．12 免疫熒光法和顯微鏡2．2．13 植物染色體蛋白的免疫染色2．2．14 染色質(zhì)免疫沉淀第3章 結(jié)果與分析3．1 通過篩選rosl的抑制子，確定了RDM1是轉(zhuǎn)錄基因沉默途徑中的一個新成員3．1．1 ROSl：植物中去甲基化酶的發(fā)現(xiàn)……第4章 RDM3和RDM4第5章 結(jié)論與討論
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