目錄
**章 實(shí)驗(yàn)須知 1
一、實(shí)驗(yàn)要求 1
二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求 1
三、藥品、試劑使用要求 2
四、實(shí)驗(yàn)安全注意事項(xiàng) 2
五、實(shí)驗(yàn)室清潔 3
第二章 常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)和方法 4
一、實(shí)驗(yàn)對(duì)照的設(shè)置 4
二、吸量管的種類及使用 5
三、離心技術(shù) 7
四、分光光度技術(shù) 8
五、電泳技術(shù) 11
六、層析技術(shù) 13
第三章 基本實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 15
實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng) 15
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)的兩性反應(yīng)和等電點(diǎn)測(cè)定 17
實(shí)驗(yàn)三 血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳 18
實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)定量實(shí)驗(yàn) 20
一、Folin-酚試劑法（Lowry法） 20
二、考馬斯亮藍(lán)染色法 22
三、BCA法 23
四、紫外分光光度測(cè)定法 24
實(shí)驗(yàn)五 凝膠層析分離血紅蛋白和魚(yú)精蛋白 25
實(shí)驗(yàn)六 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量 27
實(shí)驗(yàn)七 氨基酸的薄層層析 32
實(shí)驗(yàn)八 核酸的定量測(cè)定 34
一、紫外吸收法 34
二、DNA的定量測(cè)定二苯胺法 35
三、RNA的定量測(cè)定地衣酚法 36
實(shí)驗(yàn)九 酵母RNA的提取及組分的鑒定 37
實(shí)驗(yàn)十 核酸的瓊脂糖凝膠電泳 38
一、DNA的瓊脂糖凝膠電泳 38
二、RNA的甲醛變性凝膠電泳 40
實(shí)驗(yàn)十一 影響酶活性的因素 42
一、溫度對(duì)酶活性的影響 42
二、pH對(duì)酶活性的影響 43
三、激動(dòng)劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響 44
實(shí)驗(yàn)十二 丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶活性的影響 45
實(shí)驗(yàn)十三 酶的米氏常數(shù)（Km）測(cè)定 47
一、堿性磷酸酶Km值的測(cè)定（雙倒數(shù)作圖法） 47
二、過(guò)氧化氫酶Km值測(cè)定（Hanes-Woolf作圖法） 50
實(shí)驗(yàn)十四 乳酸脫氫酶的組分及作用 53
實(shí)驗(yàn)十五 血中葡萄糖含量的測(cè)定（鄰甲苯胺法） 54
實(shí)驗(yàn)十六 饑餓和飽食對(duì)肝糖原含量的影響 56
實(shí)驗(yàn)十七 運(yùn)動(dòng)對(duì)乳酸含量的影響 57
一、運(yùn)動(dòng)對(duì)血中乳酸含量的影響 58
二、運(yùn)動(dòng)對(duì)尿乳酸含量的影響 59
實(shí)驗(yàn)十八 血清甘油三酯的測(cè)定 60
實(shí)驗(yàn)十九 血清總膽固醇含量測(cè)定 62
實(shí)驗(yàn)二十 酮體的生成與定性 64
實(shí)驗(yàn)二十一 轉(zhuǎn)氨基作用（圓形紙層析鑒定） 65
第四章 綜合性實(shí)驗(yàn) 70
實(shí)驗(yàn)二十二 血清白蛋白、球蛋白的分離純化與鑒定 70
實(shí)驗(yàn)二十三 堿性磷酸酶的分離純化和比活性測(cè)定 73
實(shí)驗(yàn)二十四 大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 77
實(shí)驗(yàn)二十五 堿裂解法提取質(zhì)粒DNA 78
實(shí)驗(yàn)二十六 限制性內(nèi)切核酸酶對(duì)質(zhì)粒DNA的酶切 80
實(shí)驗(yàn)二十七 PCR擴(kuò)增目的基因及鑒定 81
實(shí)驗(yàn)二十八 蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn) 84
主要參考文獻(xiàn) 90