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　　生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)以不同生物分子為單元，全面、系統(tǒng)地介紹了與相應(yīng)生物分子有關(guān)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法。全書共分為五章，涵蓋蛋白質(zhì)、核酸、酶與維生素、糖類、脂類等物質(zhì)的分離、純化、定性或定量分析、功能和代謝的研究等。每章又按實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的復(fù)雜程度分為三類，基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)。相比第一版，本書以二維碼形式增加了設(shè)備使用、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析等數(shù)字資源，使學(xué)生能更積極、準(zhǔn)確地完成實(shí)驗(yàn)，提高學(xué)生的科學(xué)思維能力。本書可供高等院校生命科學(xué)類專業(yè)本、�？茖W(xué)生使用，也可供非生命科學(xué)類專業(yè)的學(xué)生使用，還可供相關(guān)專業(yè)的科研人員參考。

生命科學(xué)被公認(rèn)為21世紀(jì)的帶頭學(xué)科之一。生命科學(xué)的發(fā)展離不開生物化學(xué)，生物化學(xué)既是生命科學(xué)的基礎(chǔ)，又是生命科學(xué)的前沿，它是生物、農(nóng)、醫(yī)、藥等與生命科學(xué)相關(guān)專業(yè)的必修課程，不僅學(xué)習(xí)生命科學(xué)及與其相關(guān)學(xué)科的學(xué)生需要學(xué)習(xí)生物化學(xué)，而且學(xué)習(xí)化學(xué)、物理學(xué)、環(huán)境科學(xué)、信息科學(xué)、材料科學(xué)等的學(xué)生也需要對生物化學(xué)有所了解。生物化學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)性科學(xué)，實(shí)驗(yàn)教學(xué)占有重要的位置，學(xué)生動手能力的培養(yǎng)、創(chuàng)新能力、科學(xué)思維能力的培養(yǎng)主要依靠實(shí)驗(yàn)教學(xué)來完成。本書第一版于2014年8月出版，至今已近8年。這期間不僅生物化學(xué)學(xué)科及其技術(shù)方法上有許多新進(jìn)展，而且教學(xué)模式、教學(xué)方法也發(fā)生了很大變化，國家雙萬計(jì)劃的實(shí)施也極大地推動了豐富多彩的線上資源的推廣應(yīng)用，因此，本教材必須適應(yīng)新形勢，并使學(xué)生盡快地與迅猛發(fā)展的學(xué)科前沿接軌。為此，我們對第一版進(jìn)行了修訂。第二版在總體指導(dǎo)思想上仍遵循第一版的原則，本書以不同生物分子為單元，全面、系統(tǒng)地介紹與相應(yīng)生物分子有關(guān)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)與方法，全書共分為五章，涵蓋蛋白質(zhì)、核酸、酶與維生素、糖類、脂類等物質(zhì)的分離、純化、定性或定量分析、功能和代謝的研究等，每章又按實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的復(fù)雜程度分為三類，基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)介紹其基本原理和技術(shù)，綜合性實(shí)驗(yàn)介紹生物分子連續(xù)分離制備研究技術(shù)，設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)以培養(yǎng)學(xué)生科研技能為主。第二版在編寫形式上進(jìn)一步突出以學(xué)生為本的指導(dǎo)思想，在內(nèi)容和形式上進(jìn)行了部分變動。 1. 調(diào)整部分實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的測定改為肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定，蛋白質(zhì)的酶解及多肽的分離純化改為蛋白質(zhì)的酶解及凝膠層析法測定多肽分子量，酵母細(xì)胞壁多糖的提取及凝膠層析法測定分子量改為酵母細(xì)胞壁多糖的制備，增加實(shí)驗(yàn)丙二醛（MDA）含量的測定。 2. 為了實(shí)驗(yàn)安全及提升人文關(guān)懷，實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目前增加生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)安全，實(shí)驗(yàn)步驟后增加廢棄物處理。 3. 關(guān)于設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，為了繼續(xù)激發(fā)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新能力，同時(shí)提高這些實(shí)驗(yàn)的開設(shè)率，設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)步驟處給予簡單資料說明。 4. 為了提升本教材的直觀性、啟發(fā)性、開拓性及應(yīng)用性，本教材以二維碼形式加入設(shè)備使用、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析等數(shù)字資源，使學(xué)生能更主動、正確地完成實(shí)驗(yàn)。本書可供高等院校的生命科學(xué)等專業(yè)本、�？茖W(xué)生使用，也可供非生命科學(xué)專業(yè)的學(xué)生使用，還可供其他專業(yè)的科研人員參考。感謝第一版作者對本書編寫工作付出的努力。雖然編者對本書的修訂和再版付出了很大努力，但限于編者水平，本版難免存在缺點(diǎn)和不足，懇請各位同仁和讀者提出寶貴意見，您所提的寶貴意見與建議可以通過華中科技大學(xué)出版社轉(zhuǎn)達(dá)或者直接發(fā)E-mail給編者：chm_wangyx@ujn.edu.cn。

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)安全/1

第一章蛋白質(zhì)/3

第一節(jié)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)/3

實(shí)驗(yàn)1紙層析法分離鑒定氨基酸/3

實(shí)驗(yàn)2微量凱氏(microKjeldahl)定氮法測定蛋白質(zhì)含量/5

實(shí)驗(yàn)3Folin酚試劑法(Lowry法)測定蛋白質(zhì)含量/9

實(shí)驗(yàn)4考馬斯亮藍(lán)染色法(Bradford法)測定蛋白質(zhì)含量/11

實(shí)驗(yàn)5BCA法測定蛋白質(zhì)的含量/13

實(shí)驗(yàn)6紫外分光光度法測定蛋白質(zhì)的含量/16

實(shí)驗(yàn)7蛋白質(zhì)的性質(zhì)(顯色反應(yīng)、等電點(diǎn)沉淀)/17

實(shí)驗(yàn)8乙酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白/25

第二節(jié)綜合性實(shí)驗(yàn)/28

實(shí)驗(yàn)9膜分離技術(shù)分離純化蛋白質(zhì)/28

實(shí)驗(yàn)10聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白/33

實(shí)驗(yàn)11葡聚糖凝膠過濾層析法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量/37

實(shí)驗(yàn)12SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量/41

實(shí)驗(yàn)13蛋白質(zhì)印跡(WesternBlotting)/44

第三節(jié)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)/50

實(shí)驗(yàn)14細(xì)胞色素C的提取制備與含量測定/50

實(shí)驗(yàn)15不同生物材料中氨基酸的提取及分離分析/53

第二章核酸/55

第一節(jié)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)/55

實(shí)驗(yàn)16定磷法測定核酸的含量/55

實(shí)驗(yàn)17改良苔黑酚法測定RNA含量/57

實(shí)驗(yàn)18 紫外分光光度法測定核酸的含量/59

第二節(jié)綜合性實(shí)驗(yàn)/61

實(shí)驗(yàn)19RNA的提取與組分鑒定/61

實(shí)驗(yàn)20離子交換柱層析分離核苷酸/63

第三節(jié)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)/69

實(shí)驗(yàn)21動物肝臟DNA的提取、分離與檢測(瓊脂糖凝膠電泳)/69

第三章酶及維生素/72

第一節(jié)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)/72

實(shí)驗(yàn)22酶的特異性與高效性/72

生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)(第二版)目錄實(shí)驗(yàn)23酶促反應(yīng)動力學(xué)pH值、溫度、激活劑、抑制劑對酶促反應(yīng)速率的影響/74

實(shí)驗(yàn)24過氧化氫酶米氏常數(shù)(Km)的測定/77

實(shí)驗(yàn)25唾液淀粉酶活力的測定/79

實(shí)驗(yàn)26琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制/81

第二節(jié)綜合性實(shí)驗(yàn)/83

實(shí)驗(yàn)27脲酶的活力測定/83

實(shí)驗(yàn)28肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的測定/86

實(shí)驗(yàn)29堿性磷酸酶的分離純化及比活力測定/90

實(shí)驗(yàn)30酵母醇脫氫酶的分離純化及活力測定/93

實(shí)驗(yàn)31乳酸脫氫酶(LDH)同工酶的瓊脂糖凝膠電泳/97

實(shí)驗(yàn)32維生素C的定量測定2，6二氯酚靛酚滴定法/100

第三節(jié)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)/102

實(shí)驗(yàn)33蛋白質(zhì)的酶解及凝膠層析法測定多肽相對分子質(zhì)量/102

第四章糖類/105

第一節(jié)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)/105

實(shí)驗(yàn)343，5二硝基水楊酸比色法測定還原糖/105

實(shí)驗(yàn)35蒽酮法測定可溶性總糖/108

第二節(jié)綜合性實(shí)驗(yàn)/111

實(shí)驗(yàn)36肌糖原的酵解作用/111

第三節(jié)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)/114

實(shí)驗(yàn)37酵母細(xì)胞壁多糖的制備/114

第五章脂類/117

第一節(jié)基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)/117

實(shí)驗(yàn)38粗脂肪含量的測定(索氏抽提法)/117

實(shí)驗(yàn)39酸值的測定/119

實(shí)驗(yàn)40卵磷脂的制備和脂肪碘值的測定/121

實(shí)驗(yàn)41丙二醛(MDA)含量的測定/124

實(shí)驗(yàn)42薄膜層析法分離血清脂蛋白/126

第二節(jié)綜合性實(shí)驗(yàn)/128

實(shí)驗(yàn)43脂肪酸的氧化/128

第三節(jié)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)/130

實(shí)驗(yàn)44大豆品種的質(zhì)量分析/130

附錄常用緩沖液的配制/133

參考文獻(xiàn)/138

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