本實驗教材共有91個實驗,內容較多,包含普通動物學、普通植物學、生理學、普通植物生理學、遺傳學、生物化學、分子生物學、細胞生物學、微生物學、人體解剖學實驗以及為培養(yǎng)學生科研思維而設置的生物科學綜合實驗。實驗項目的設置與高等院校生命科學相關專業(yè)本科教材內容配套的同時涵蓋了多種生命科學前沿技術和方法,印證教材理論的同時可進一步拓寬學生的知識面,為其從事生物技術及其相關領域的科學研究工作打下基礎。本實驗教材每一實驗章節(jié),設置了課程簡介、教學目標和實驗項目概述,引領學生通過預習主動銜接實驗課程技術和理論課程知識,形成專業(yè)知識體系。同時為方便教學,實驗項目基本上都按實驗目的、實驗原理、實驗器材及試劑、實驗步驟、注意事項和思考題,這五個部分來編寫。本書內容全面,可操作性強,可作為理工型高校生物相關專業(yè)本科生實驗教材,也可為相關科研人員提供實驗技術參考。
生物學是一門以實驗為手段研究生命活動規(guī)律的學科,因此實驗教學在生物學人才培養(yǎng)中占有重要地位。高校生物學實驗教材既需要與理論教學相銜接,又需要與時俱進。本實驗教材結合理工型高校生物學科定位、人才培養(yǎng)目標和辦學特色,涵蓋動物學、植物學、生理學、植物生理學、遺傳學、生物化學、分子生物學、細胞生物學、微生物學和人體解剖學在內的 10 門生物學科實驗教學內容。本教材系統(tǒng)考慮生物專業(yè)的必要實驗并合理分布到有關理論課程的對應部分,避免了各門課程對應實驗的簡單重復或相互脫節(jié)。同時,本實驗教材增設了培養(yǎng)學生實踐創(chuàng)新能力的生物科學綜合實驗部分,以期提高生物學科的實驗教學水平,并對理工型高校生物學科的實驗教學起到一定的示范和參考作用。
全書由大連理工大學生命科學與藥學學院教師編寫。具體分工如下:第一章由王黎編寫;第二、四章由徐品三編寫;第三章由史美云編寫;第五章由張鄭瑤編寫;第六、七章由劉宇博、李文利、黃煌共同編寫;第八章由薛宏宇編寫;第九章由賀雷雨編寫;第十章由韓彥槊編寫;第十一章由趙靜編寫。全書由劉宇博和李文利擬訂提綱,黃煌統(tǒng)稿,趙靜審定并組織實施。
由于時間倉促、編寫水平有限,書中疏漏之處在所難免,誠懇希望讀者批評指正。
編者
2023年1月
第一章 動物學實驗 001
實驗一 學習使用顯微鏡 002
實驗二 原生動物的形態(tài)與結構 006
實驗三 腔腸動物的外形與結構 007
實驗四 扁形動物的形態(tài)與結構 009
實驗五 原腔動物的形態(tài)與構造 011
實驗六 節(jié)肢動物的外形和內部構造 013
實驗七 鯽魚的外形和內部解剖 017
實驗八 小鼠的外形和內部解剖 020
第二章 植物學實驗 024
實驗一 植物細胞的觀察 025
實驗二 植物各種組織的觀察 026
實驗三 種子和幼苗的觀察 029
實驗四 根的形態(tài)結構 031
實驗五 莖的形態(tài)和結構 034
實驗六 藻類和苔蘚的觀察 035
本章附錄 037
第三章 生理學實驗 039
實驗一 紅細胞滲透脆性實驗 040
實驗二 家兔的解剖觀察 042
實驗三 家兔呼吸運動的調節(jié) 044
實驗四 蟾蜍坐骨神經腓腸肌標本制備及不同強度和頻率刺激對肌肉收縮的影響 046
實驗五 反射弧分析、期前收縮與代償間歇 051
實驗六 人體心音聽診 053
實驗七 人體血壓測量 054
實驗八 蛙心起搏點的觀察與分析 056
實驗九 離體蛙心灌流實驗 057
實驗十 小鼠一側小腦損毀的效應 061
實驗十一 離體小腸段平滑肌生理特性的觀察 062
第四章 植物生理學實驗 066
實驗一 植物組織水勢的測定 067
實驗二 根系活力的測定 068
實驗三 葉綠素 a、葉綠素 b 含量的測定 070
實驗四 植物光合強度的測定 072
實驗五 植物呼吸強度的測定 073
實驗六 丙二醛的測定 074
實驗七 種子活力的測定 076
實驗八 果蔬含酸量的測定 077
實驗九 果蔬維生素 C 含量的測定 078
第五章 遺傳學實驗 081
實驗一 果蠅性別鑒定、常見性狀及生活史觀察 082
實驗二 植物多倍體誘發(fā)及微核檢測 085
實驗三 植物細胞線粒體 DNA 的提取 089
實驗四 植物細胞葉綠體 DNA 的分離純化 091
實驗五 哺乳動物細胞染色體標本的制備和觀察 093
實驗六 人體細胞性染色質的檢測 095
實驗七 人類 PTC 味盲基因的遺傳學分析 097
實驗八 多基因遺傳的人類指紋嵴分析 099
實驗九 綠色熒光蛋白突變基因在大腸桿菌的表達與檢測 101
實驗十 人類親子關系鑒定 107
第六章 生物化學實驗 111
實驗一 醋酸纖維素薄膜電泳法分離牛血清蛋白 112
實驗二 考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度 115
實驗三 3,5-二硝基水楊酸法測定食用面粉中的總糖和還原糖 118
實驗四 肝糖原的提取和鑒定 120
實驗五 轉氨酶的轉氨基反應鑒定 123
實驗六 DNA 的瓊脂糖凝膠電泳檢測 126
實驗七 堿性磷酸酶的提純、Km 值計算及比活力測定 128
實驗八 聚丙烯酰胺凝膠電泳測蛋白質的分子量 132
實驗九 免疫印跡法鑒定目的蛋白 136
實驗十 肌糖原的酵解作用 139
第七章 分子生物學實驗 143
實驗一 PCR 擴增堿性磷酸酶基因(phoA) 及瓊脂糖凝膠電泳檢測 144
實驗二 質粒 DNA 的制備 147
實驗三 DNA 片段酶切與瓊脂糖凝膠電泳回收 149
實驗四 目的基因片段與載體的連接 152
實驗五 大腸桿菌感受態(tài)制備與 DNA 轉化 153
實驗六 陽性克隆的篩選和酶切鑒定 155
實驗七 動物基因組 DNA 的提取 157
實驗八 植物基因組DNA 提取 159
實驗九 微生物基因 DNA 的提取 160
實驗十 動植物 mRNA 的提取及 cDNA 合成 163
第八章 細胞生物學實驗 167
實驗一 動物細胞培養(yǎng)的無菌準備及主要儀器設備的使用 167
實驗二 動物細胞培養(yǎng)及動物細胞計數(shù) 171
實驗三 細胞的傳代培養(yǎng)和形態(tài)觀察 173
實驗四 細胞的凍存 175
實驗五 細胞的復蘇 177
實驗六 動物細胞蓋玻片單層培養(yǎng)及細胞骨架和細胞核觀察 178
實驗七 MTT 法測定動物細胞生長曲線 181
實驗八 細胞遷移分析劃痕實驗 183
實驗九 抗癌藥物對腫瘤細胞增殖的影響 (設計性實驗) 184
第九章 微生物學實驗 186
實驗一 培養(yǎng)基的配制與滅菌 187
實驗二 微生物的分離與接種技術 189
實驗三 平板菌落計數(shù) 191
實驗四 酵母的計數(shù)和形態(tài)觀察 192
實驗五 細菌染色技術和形態(tài)觀察 194
實驗六 放線菌的形態(tài)觀察 196
實驗七 霉菌的形態(tài)觀察 198
實驗八 細菌生長曲線的測定 199
實驗九 噬菌體分離與純化技術 201
第十章 人體解剖學實驗 204
實驗一 運動系統(tǒng) 205
實驗二 消化系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng) 207
實驗三 泌尿系統(tǒng)和生殖系統(tǒng) 209
實驗四 心血管系統(tǒng) 211
實驗五 感官(眼耳)和周圍神經系統(tǒng) 213
實驗六 中樞神經傳導通路和內分泌系統(tǒng) 214
第十一章 生物科學綜合實驗 217
實驗一 pEGFP-C1-Mastl真核表達載體的構建 218
實驗二 pEGFP-C1-Mastl重組質粒轉染 HeLa 細胞 225
實驗三 MTT 法檢測 Mastl對細胞增殖的影響 229
參考文獻 232