本書以一份“麥稻”特異水稻新材料,開展了相關(guān)研究。首先分析麥稻的典型表型,之后分析克隆了其候選基因;分析了OsMADS1Olr突變位點(diǎn)與麥稻表型在代表性水稻材料中的關(guān)聯(lián)性、其突變位點(diǎn)處的氨基酸保守性以及其qRT-PCR表達(dá)譜;利用OsMADS1Olr過表達(dá)植株和OsMADS1-RNAi植株,驗(yàn)證并解析OsMADS1基因調(diào)控水稻粒型的功能;研究了OsMADS1基因?qū)Φ久淄庥^品質(zhì)與貯藏蛋白含量的調(diào)控功能,為OsMADS1在水稻粒型與品質(zhì)分子育種中具有重要的應(yīng)用潛力與價值提供了科學(xué)依據(jù)并奠定了一定科研基礎(chǔ)。
李鵬慧,女,博士,助理研究員,河南輝縣人。2013年6月畢業(yè)于西北農(nóng)林科技大學(xué)園藝學(xué),獲理學(xué)學(xué)士學(xué)位。2016年6月畢業(yè)于華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,獲理學(xué)碩士學(xué)位。2020年12月畢業(yè)于中國科學(xué)院成都生物研究所植物學(xué)。于2021年9月來中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)田灌溉研究所工作。主要研究方向?yàn)橥庠凑{(diào)控物質(zhì)調(diào)控作物逆境脅迫的分子機(jī)制和作物控水增質(zhì)的品質(zhì)研究。本人圍繞外源物質(zhì)對作物逆境脅迫的調(diào)節(jié)以及作物控水提質(zhì)增效開展研究,目前主持河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目和中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)等課題2項(xiàng)。
1 緒論
1.1 水稻粒型的調(diào)控研究進(jìn)展
1.1.1 水稻粒型的遺傳概況
1.1.2 水稻粒型的調(diào)控機(jī)制研究進(jìn)展
1.2 稻米淀粉和貯藏蛋白的調(diào)控研究進(jìn)展 1
1.2.1 稻米淀粉和貯藏蛋白概況
1.2.2 稻米淀粉的調(diào)控研究概況
1.2.3 稻米貯藏蛋白的調(diào)控研究進(jìn)展
1.3 水稻OsMADS1基因的研究進(jìn)展
1.3.1 OsMADS1基因調(diào)控花發(fā)育的研究進(jìn)展
1.3.2 OsMADS1基因調(diào)控谷粒發(fā)育的研究進(jìn)展
1.4 本研究的目的意義
2 麥稻的典型表型鑒定與分析
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 水稻材料種植
2.2.2 水稻種子性狀調(diào)查與數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
2.2.3 水稻花結(jié)構(gòu)的解剖觀察與石蠟切片觀察
2.2.4 水稻幼花的掃描電鏡觀察與解剖鏡觀察
2.2.5 水稻花粉育性與花粉萌發(fā)率分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 “麥稻”命名的由來
2.3.2 麥稻的典型形態(tài)特征
2.3.3 麥稻內(nèi)外稃的組織細(xì)胞學(xué)分析
2.3.4 麥稻內(nèi)外稃形態(tài)發(fā)育觀察分析
2.3.5 麥稻花器官形態(tài)結(jié)構(gòu)變異觀察分析
2.3.6 麥稻配子體育性與小穗育性觀察分析
2.4 討論
3 麥稻候選基因OsMADS1的克隆
3.1 材料
3.2 方法
3.2.1 水稻材料種植
3.2.2 遺傳分離群體的構(gòu)建
3.2.3 目標(biāo)基因的圖位克隆
3.2.4 目的基因的MBS分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 麥稻表型的遺傳分析
3.3.2 麥稻調(diào)控基因OsMADS1的圖位克隆
3.3.3 麥稻調(diào)控基因OsMADS1的MBS驗(yàn)證分析
3.4 討論
4 OsMADS1基因的功能預(yù)測與表達(dá)分析
4.1 材料
4.2 方法
4.2.1 OsMADS1基因突變位點(diǎn)與表型關(guān)聯(lián)性分析
4.2.2 OsMADS1Olr蛋白突變位點(diǎn)處氨基酸的保守性分析
4.2.3 OsMADS1基因的qRT-PCR表達(dá)譜分析
4.2.4 OsMADS1基因的組織特異性表達(dá)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 OsMADS1基因突變位點(diǎn)與麥稻表型的關(guān)聯(lián)性分析
4.3.2 OsMADS1Olr蛋白突變位點(diǎn)處的氨基酸保守性分析
4.3.3 OsMADS1與OsMADS1Olr基因的表達(dá)譜及OsMADS1的組織特異性表達(dá)
4.4 討論
5 OsMADS1基因調(diào)控水稻粒型的功能解析
5.1 材料
5.2 方法
5.2.1 轉(zhuǎn)基因載體構(gòu)建和遺傳轉(zhuǎn)化
5.2.2 qRT-PCR、RT-PCR及測序分析
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 OsMADS1Olr基因過表達(dá)功能驗(yàn)證分析
5.3.2 OsMADS1基因的RNAi功能驗(yàn)證
5.3.3 谷粒發(fā)育調(diào)控代表性基因的表達(dá)分析
5.4 討論
6 OsMADS1基因?qū)Φ久淄庥^品質(zhì)和貯藏蛋白的調(diào)控功能研究
6.1 材料
6.2 方法
6.2.1 種子灌漿過程干物質(zhì)動態(tài)積累曲線測定
6.2.2 稻米品質(zhì)測定
6.2.3 比較轉(zhuǎn)錄組分析
6.2.4 差異表達(dá)基因熱圖分析
6.2.5 代表性差異表達(dá)基因qRT-PCR驗(yàn)證分析
6.2.6 pOsOle18::OsMADS1-RNAi種子特異性干擾載體的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
6.3 結(jié)果與分析
6.3.1 麥稻種子干物質(zhì)積累動態(tài)分析 7
6.3.2 麥稻稻米外觀品質(zhì)分析
6.3.3 麥稻稻米淀粉結(jié)構(gòu)觀察分析
6.3.4 麥稻稻米淀粉和貯藏蛋白含量測定分析
6.3.5 麥稻糙米、精米和米糠的貯藏蛋白含量測定分析
6.3.6 麥稻與日本晴中貯藏蛋白合成與轉(zhuǎn)運(yùn)途徑相關(guān)調(diào)控基因的差異表達(dá)分析
6.3.7 轉(zhuǎn)基因水稻中稻米貯藏蛋白含量測定分析
6.4 討論
7 結(jié)論與展望
附錄
參考文獻(xiàn)