《化學生物學綜合實驗》包含了當今化學生物學研究前沿的常用實驗技術。全書精選了7個專題實驗,涵蓋核酸和蛋白質(zhì)的合成、小分子調(diào)控、相互作用研究、生物活性分析、活體標記和熒光成像技術等內(nèi)容,并詳細介紹了開展化學生物學研究所需的背景知識以及實驗技術。
《化學生物學綜合實驗》適合作為高年級本科生、研究生及化學生物學相關領域研究人員的教學用書或參考書,旨在滿足國內(nèi)高水平大學的教育需求,以期能夠為我國化學生物學青年人才的培養(yǎng)提供實驗課使用的教學手冊,從而更好地迎接科技領域的挑戰(zhàn)。
專題一 核酸的化學合成及其性質(zhì)探究 1
實驗1-1 DNA的化學合成及DNA解鏈溫度的測定 3
實驗1-2 核酸適體對凝血酶活性的抑制實驗 10
實驗1-3 G-四鏈體對hemin催化活性的促進實驗 14
專題二 新型溶酶體熒光探針的設計、合成與評估 18
實驗2-1 dRB-EDA探針的合成及熒光性能評估 20
實驗2-2 dRB-EDA探針的細胞溶酶體成像性能評估 24
附1:細胞實驗基本操作 28
專題三 綠色熒光蛋白的克隆表達和表征 29
實驗3-1 質(zhì)粒載體DNA的制備與檢測 34
實驗3-2 PCR技術擴增目的基因 42
實驗3-3 外源基因的轉(zhuǎn)化與表達 48
附2:軟件資源 58
附3:微生物實驗基本操作 59
專題四 非經(jīng)典氨基酸的定點修飾與標記 61
實驗4-1 非經(jīng)典氨基酸Alkyne-UAA的定點修飾與點擊反應標記 66
專題五 蛋白質(zhì)的非定點熒光標記 73
實驗5-1 利用FITC對蛋白質(zhì)進行非定點熒光標記 82
專題六 細胞生物正交代謝氟標記 87
實驗6-1 腫瘤細胞的特異性氟標記 92
專題七 功能小分子與底物蛋白質(zhì)的非共價相互作用研究 98
實驗7-1 電噴霧質(zhì)譜研究磷酰基對丙氨酸與溶菌酶分子間相互作用的影響 103
實驗7-2 肌紅蛋白的電噴霧質(zhì)譜研究 106
附錄 110
附錄1 常用儀器設備使用規(guī)程 110
附錄2 主要試劑的配制 115
附錄3 實驗室用水 119
附錄4 常見的市售酸堿的濃度 121
附錄5 普通使用的抗生素溶液 122
附錄6 實驗室安全 123