本書是全球輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域備受推崇的免疫血液學(xué)方法大全，至今已經(jīng)更新到第4版，一直在輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域廣泛使用。全書分15章，內(nèi)容包括同種和自身抗體的檢測、高頻率抗體檢測、孕婦產(chǎn)前抗體檢測、抗體特異性鑒定、酶處理紅細(xì)胞、試劑紅細(xì)胞、吸附放散技術(shù)，藥物誘導(dǎo)性溶血，以及細(xì)胞分離技術(shù)和ABO疑難血型鑒定等技術(shù)。對每項(xiàng)技術(shù)都有操作程序、結(jié)果判斷、試劑配制、注意事項(xiàng)、避免假陰性和假陽性結(jié)果的技術(shù)要點(diǎn)等描述，涵蓋幾乎全部免疫血液學(xué)方法。
1900 年ABO 血型的發(fā)現(xiàn)，不僅使輸血成為一種安全的醫(yī)療救治手段，而且誕生了專門研究人類血型的免疫血液學(xué)這門學(xué)科。血型匹配是安全輸血的第一要素，所以說只要有輸血就有血型問題。ABO 和所有其他血型都是使用免疫血液學(xué)方法所鑒定，至今已經(jīng)發(fā)現(xiàn)45個(gè)血型系統(tǒng)，380 多個(gè)血型抗原。雖然在20 世紀(jì)末，隨著整個(gè)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域進(jìn)入基因組時(shí)代，允許在分子水平上預(yù)測血型的基因型，但是血型的定義和鑒定，仍然以免疫血液學(xué)方法作為金標(biāo)準(zhǔn)。
2021 年，美國血庫協(xié)會(huì)將AABB 全稱更改為Association for the Advancement of Blood& Biotherapies（血液與生物治療促進(jìn)會(huì)），以履行更廣泛的使命。2021 年末，國際亞太血型與基因組學(xué)協(xié)會(huì)開始以叢書形式翻譯出版AABB 出版物，以便國內(nèi)讀者借鑒國際輸血醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的知識和經(jīng)驗(yàn)。在AABB 出版委員會(huì)的全力支持下，叢書的第一部《免疫血液學(xué)分子檢測標(biāo)準(zhǔn)》已于2023 年初由人民衛(wèi)生出版社出版發(fā)行。本書為叢書的第二部，中文譯本書名定為《免疫血液學(xué)方法（第4 版）》，原版書名為Judds Methods in Immunohematology（4thEdition）。
十年磨一劍，Judds Methods in Immunohematology 這把劍磨了35 年。從1988 年的第1版問世以來，已經(jīng)改版4 次。1994 年出第2 版；2008 年，第3 版；2022 年為第4 版。篇幅從最初的288 頁增長到500 頁，然后到667 頁，再到如今的719 頁（英文原版頁數(shù)）。
《免疫血液學(xué)方法（第4 版）》有15 章，其內(nèi)容包括同種和自身抗體的檢測、高頻率抗體檢測、孕婦產(chǎn)前抗體檢測、抗體特異性鑒定、酶處理紅細(xì)胞、試劑紅細(xì)胞、吸附放散技術(shù)，藥物誘導(dǎo)性溶血，以及細(xì)胞分離技術(shù)和ABO 疑難血型鑒定等技術(shù)。對每項(xiàng)技術(shù)都有操作程序、結(jié)果判斷、試劑配制、注意事項(xiàng)、避免假陰性和假陽性結(jié)果的技術(shù)要點(diǎn)等描述，涵蓋幾乎全部免疫血液學(xué)方法。內(nèi)容也隨著免疫血液學(xué)的發(fā)展得以更新，不僅全面系統(tǒng)，而且還愈加翔實(shí)豐富。原著作者對技術(shù)背景的描述，涉及免疫診斷基本原理的方方面面，娓娓道來，讓讀者在免疫血液學(xué)的世界里遨游，沉浸其中，忘記了周圍的一切。
翻譯出版這部專著，對于中國輸血領(lǐng)域讀者也許有特殊的意義。中國的免疫血液學(xué)研究起步較晚，尚無免疫血液學(xué)方法學(xué)專著。雖然近年來中國學(xué)者在ABO 和Rh 等血型基因位點(diǎn)上檢測出數(shù)以百計(jì)的新等位基因，但是在目前被正式命名的紅細(xì)胞血型抗原中，沒有一個(gè)血型是在中國人群中發(fā)現(xiàn)的。率先發(fā)現(xiàn)中國人血型已經(jīng)成為中國學(xué)者面對的一個(gè)挑戰(zhàn)，此刻出版這本國際知名的免疫血液學(xué)方法學(xué)方面的專著，對于發(fā)現(xiàn)中國人血型、填補(bǔ)國家空白將有所助益。
原著介紹免疫血液學(xué)方法非常全面，采用獨(dú)特的描述方式，便于讀者理解和實(shí)驗(yàn)室操作。在翻譯中，我們力求本地化，使譯文符合國人的語言習(xí)慣。鑒于時(shí)間倉促，知識和能力有限，本譯稿難免有疏漏之處，還望廣大讀者批評指正。
寶劍鋒從磨礪出，譯者本著求真務(wù)實(shí)的精神，從靜謐的午夜，到東方的一縷晨曦，精雕細(xì)琢，孜孜不倦。終于在金秋十月，譯稿完成。就讓我們共同啟封，一起領(lǐng)略免疫血液學(xué)的風(fēng)采！
高宏軍 趙桐茂
2023 年10 月18 日
任江蘇省諾貝爾獎(jiǎng)得主蒂姆亨特研究院研究員，負(fù)責(zé)血型基因檢測新型試劑、芯片檢測技術(shù)和大數(shù)據(jù)分析、人類血型數(shù)據(jù)庫的建設(shè)工作。衛(wèi)健委血型基因檢測聯(lián)合參比（江陰）實(shí)驗(yàn)室主任。亞太血型與基因組學(xué)協(xié)會(huì)(IAABG) 委員。國際輸血協(xié)會(huì)（ISBT）會(huì)員和大會(huì)代表。美國血庫協(xié)會(huì)（AABB）會(huì)員。
第1 章 常規(guī)試管法 / 1
1-A. ABO 定型和RhD 分型 / 2
1-B. 意外抗體檢測：LISS 添加劑程序 / 6
1-C. LISS 抗球蛋白交叉配血 / 9
1-D. 弱D 檢測程序 / 12
1-E. 立即離心交叉配血 / 16
1-F. 血清學(xué)反應(yīng)分級和評分 / 19
1-G. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)能力測試：IAT 判讀和分級程序 / 21
第2 章 抗體檢測 / 26
2-A. 白蛋白添加/ 分層檢測 / 27
2-B. 白蛋白抗球蛋白檢測 / 29
2-C. 酶IAT 檢測 / 32
2-D. LIP IAT 檢測 / 36
2-E. LISS 洗滌IAT 檢測 / 40
2-F. LISS 無花果蛋白酶IAT 檢測 / 43
2-G. 聚乙二醇IAT 檢測 / 47
2-H. 直接凝集法檢測冷反應(yīng)性抗體 / 50
2-I. 生理鹽水IAT 檢測 / 53
第3 章 酶技術(shù) / 56
3-A. 用菠蘿蛋白酶一步法檢測抗體 / 58
3-B. 用- 胰凝乳蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 60
3-C. 用無花果蛋白酶一步法檢測抗體 / 63
3-D. 用無花果蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 65
3-E. 用神經(jīng)氨酸酶處理紅細(xì)胞（T- 活化） / 68
3-F. 用木瓜蛋白酶一步法檢測抗體 / 70
3-G. 用木瓜蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 72
3-H. 用鏈霉蛋白酶處理紅細(xì)胞 / 75
3-I. 用胰蛋白酶（粗酶）處理紅細(xì)胞 / 78
3-J. 用胰蛋白酶（純化酶）處理紅細(xì)胞 / 81
3-K. 用ZZAP 處理紅細(xì)胞 / 84
第4 章 放散技術(shù) / 86
4-A. 放散前洗滌 / 87
4-B. 使用氯仿放散抗體 / 89
4-C. 用氯仿/ 三氯乙烯放散抗體 / 92
4-D. 用檸檬酸放散抗體 / 95
4-E. 用冷甘氨酸放散抗體 / 98
4-F. 從基質(zhì)中放散抗體 / 101
4-G. 用醚放散抗體 / 104
4-H. 凍融法放散抗體（Lui 法） / 107
4-I. 凍融法放散抗體（Wiener 法） / 109
4-J. 熱放散抗體 / 112
4-K. 用二氯甲烷放散抗體 / 114
4-L. 用微波放散抗體 / 117
4-M. 放散來自胎盤組織的抗體 / 119
4-N. 使用超聲放散抗體 / 121
4-O. 用二甲苯/D- 檸檬烯放散抗體 / 123
4-P. 使用EDTA- 甘氨酸-HCl 從細(xì)胞上解離IgG / 126
4-Q. 使用二磷酸氯喹從細(xì)胞中解離IgG / 128
第5 章 細(xì)胞分離方法 / 131
5-A. 通過直接離心收集自身紅細(xì)胞 / 132
5-B. 使用鄰苯二甲酸酯收集自身紅細(xì)胞 / 134
5-C. 使用Percoll 程序進(jìn)行細(xì)胞分離 / 137
5-D. 在血紅蛋白S 或鐮狀細(xì)胞病中收集自身紅細(xì)胞 / 140
5-E. 用抗體分離混合細(xì)胞群體 / 142
5-F. 單個(gè)核細(xì)胞分離程序 / 145
第6 章 檢測抗體的其他血清學(xué)方法 / 147
6-A. 凝膠：制備緩沖凝膠柱 / 149
6-B. 凝膠：制備抗-IgG 柱 / 152
6-C. 凝膠：使用緩沖凝膠柱檢測抗體 / 155
6-D. 凝膠：使用抗-IgG 柱檢測抗體 / 157
6-E. 凝膠：調(diào)整預(yù)填充的中性緩沖柱，用于小鼠IgG 抗體 / 159
6-F. 凝膠：調(diào)整預(yù)填充的抗-IgG 柱，用于改良的PEG-IAT / 162
6-G. 微孔板：ABO 定型和RhD 分型程序 / 165
6-H. 微孔板：使用LISS 程序檢測抗體 / 169
6-I. 微孔板：LIP 技術(shù)程序 / 172
6-J. 毛細(xì)管：鹽水凝集程序 / 174
6-K. 毛細(xì)管：白蛋白單層程序 / 176
6-L. 毛細(xì)管：白蛋白雙層程序 / 178
6-M. 毛細(xì)管：木瓜蛋白酶一步法程序 / 180
6-N. 毛細(xì)管：無花果蛋白酶一步法程序 / 182
6-O. 毛細(xì)管：預(yù)包被紅細(xì)胞上的IAT 程序 / 184
6-P. 毛細(xì)管：預(yù)包被IAT 程序 / 186
第7 章 試劑紅細(xì)胞（非酶處理）/ 194
7-A. 制備C3b/C4b 包被的紅細(xì)胞 / 196
7-B. 用食糖制備C3b/C4b 包被的紅細(xì)胞 / 198
7-C. 制備IgM/C3b 包被的紅細(xì)胞/ 200
7-D. 制備C3b 包被的紅細(xì)胞：Fruitstone 法 / 203
7-E. 制備C4b 包被的紅細(xì)胞/ 205
7-F. 制備IgA 和IgM 包被的紅細(xì)胞 / 207
7-G. 制備IgG 包被的紅細(xì)胞 / 210
7-H. 處理紅細(xì)胞：AET 程序 / 212
7-I. 處理紅細(xì)胞：0.2M DTT 程序 / 214
7-J. 滅活S 抗原：次氯酸鈉處理 / 216
7-K. 冰凍紅細(xì)胞：甘油保存和回收 / 218
7-L. 冰凍紅細(xì)胞：液氮保存和回收 / 220
第8 章 抗體鑒定 / 223
8-A. 單個(gè)或多個(gè)抗體的鑒定 / 224
8-B. 管理有冷凝集素的樣品和患者 / 231
8-C. 譜細(xì)胞結(jié)果評估：排除 / 234
8-D. 精選細(xì)胞過程 / 236
8-E. 選擇抗原陰性的血液輸血 / 238
8-F. 確定概率水平 / 241
8-G. 酸化血清 / 244
8-H. 使用吸附放散聯(lián)合程序 / 245
8-I. 檢測胰蛋白酶抗性NVG 受體 / 248
8-J. 在抑制程序中使用可溶性血型物質(zhì) / 250
8-K. 用DIDS 抑制緡錢狀凝集 / 252
8-L. 鑒定抗-Nform / 254
8-M. 通過兩階段EDTA-IAT 檢測補(bǔ)體固定抗體 / 256
第9 章 高頻率抗原的抗體 / 260
9-A. 用混合血漿或血清抑制抗體 / 266
9-B. 鑒定抗-Ch/Rg：快速程序 / 268
9-C. 識別HLA 決定簇的抗體 / 270
9-D. 使用同種異體C4 吸附抗-Ch/Rg / 272
9-E. 使用2mol/L 尿素篩選/ 確認(rèn)Jk（ab）紅細(xì)胞 / 275
第10 章 產(chǎn)前和圍產(chǎn)期檢測 / 277
10-A. 妊娠期檢查 / 282
10-B. Rh 免疫球蛋白給藥 / 284
10-C. 分娩時(shí)胎兒和新生兒溶血病的評估 / 287
10-D. 產(chǎn)前抗體滴定程序 / 289
10-E. 通過吸附放散試驗(yàn)區(qū)分抗-G 和抗-C 抗-D / 292
10-F. 在母親RhD 陰性樣品中篩查胎兒RhD 陽性紅細(xì)胞 / 295
10-G. 用酶聯(lián)抗球蛋白試驗(yàn)定量抗-D / 298
10-H. 大量胎母輸血的篩查（改良的Kleihauer-Betke 酸放散試驗(yàn)） / 302
10-I. 用酶聯(lián)抗球蛋白試驗(yàn)量化胎母輸血 / 305
10-J. 分光光度法分析羊水 / 309
10-K. 處理被華通膠污染的臍帶血 / 312
第11 章 研究含有自身抗體的樣品 / 314
11-A. 免疫性溶血和/ 或DAT 陽性病例的調(diào)查 / 318
11-B. 抗球蛋白試驗(yàn)：抗-IgG 和抗-C3 直接試驗(yàn)（試管法） / 322
11-C. 抗球蛋白試驗(yàn)：抗-IgM 和抗-IgA 直接試驗(yàn)（試管法） / 325
11-D. 抗球蛋白試驗(yàn)：抗-IgM 和抗-IgA 直接檢測（柱凝集試驗(yàn)） / 327
11-E. 抗球蛋白試驗(yàn)：使用聚凝胺的直接試驗(yàn) / 329
11-F. 抗球蛋白試驗(yàn)：酶聯(lián)DAT / 332
11-G. 分散自身凝集 / 335
11-H. 檢測冷反應(yīng)性自身抗體的熱振幅 / 337
11-I. 冷反應(yīng)性自身抗體滴定法診斷試驗(yàn)（過夜法）/ 339
11-J. 通過滴定法檢測冷反應(yīng)性自身抗體 / 341
11-K. 通過滴定確定冷反應(yīng)性自身抗體的特異性 / 343
11-L. 用自身紅細(xì)胞吸附冷反應(yīng)性自身抗體 / 345
11-M. 用異源（兔）紅細(xì)胞吸附冷自身抗體 / 347
11-N. 用Donath-Landsteiner 試驗(yàn)檢測PCH / 349
11-O. 通過滴定法測定溫反應(yīng)性自身抗體的RH 相關(guān)特異性 / 352
11-P. 用酶處理的自身紅細(xì)胞吸附溫反應(yīng)性自身抗體 / 354
11-Q. 用ZZAP 處理的自身紅細(xì)胞吸附自身抗體 / 357
11-R. 用ZZAP 處理的自身紅細(xì)胞吸附自身抗體（微量法） / 360
11-S. 用同種異體紅細(xì)胞吸附溫反應(yīng)性自身抗體 / 363
11-T. 評估同種異體吸附血清結(jié)果：畫線排除 / 366
11-U. 預(yù)熱的間接抗球蛋白試驗(yàn) / 370
第12 章 研究藥物誘導(dǎo)溶血 / 373
12-A. 將藥物溶解在溶液中 / 381
12-B. 準(zhǔn)備尿液以檢測代謝物依賴性抗體 / 385
12-C. 檢測與藥物處理紅細(xì)胞反應(yīng)的藥物依賴性抗體 / 387
12-D. 檢測半合成青霉素的抗體 / 391
12-E. 檢測頭孢噻吩依賴性抗體 / 394
12-F. 檢測存在藥物時(shí)發(fā)生反應(yīng)的藥物依賴性抗體 / 396
12-G. 檢測存在藥物時(shí)發(fā)生反應(yīng)的代謝物依賴性抗體 / 400
第13 章 研究ABO 定型問題 / 404
13-A. 混合視野反應(yīng)研究 / 412
13-B. ABO 定型反應(yīng)不一致的研究 / 414
13-C. 評估ABO 定型不一致 / 416
13-D. 使用蛋白酶處理紅細(xì)胞進(jìn)行ABO 定型的解析 / 418
13-E. 通過吸附和熱放散確認(rèn)弱A 或弱B 抗原表達(dá) / 420
13-F. 通過吸附和凍融放散法（Lui 法）確認(rèn)弱A 或弱B 抗原表達(dá) / 423
13-G. 檢測次要紅細(xì)胞群和ABO 混合物 / 426
13-H. 確定ABH 分泌型狀態(tài) / 428
13-I. 測定H 抗原的表達(dá) / 430
13-J. 分離A∶O 混合物 / 432
13-K. 通過O 型紅細(xì)胞的轉(zhuǎn)化檢測A 和B 轉(zhuǎn)移酶 / 434
13-L. 預(yù)熱的ABO 反定型 / 436
13-M. 選擇含有高效價(jià)抗-A 和/ 或抗-B 的血漿 / 438
第14 章 研究紅細(xì)胞多凝集 / 440
14-A. 用AB 血清和臍帶血血清檢測多凝集 / 442
14-B. 制備外源凝集素粗提物 / 444
14-C. 制備鼠尾草凝集素粗提物 / 447
14-D. 制備純化的外源凝集素溶液 / 450
14-E. 用聚凝胺聚集紅細(xì)胞 / 452
14-F. 乙�；t細(xì)胞 / 454
14-G. 抑制獲得性B 的反應(yīng)性 / 457
14-H. 用酸化抗-B 檢測紅細(xì)胞 / 459
第15 章 其他方法 / 461
15-A. 檢測PNH：酸溶血試驗(yàn)（哈姆試驗(yàn)） / 462
15-B. 檢測HEMPAS：改良的酸溶血試驗(yàn)（哈姆試驗(yàn)） / 465
15-C. 將IgG 抗體轉(zhuǎn)化為直接凝集素 / 467
15-D. 使用51Cr 標(biāo)記的紅細(xì)胞評估紅細(xì)胞存活率 / 469
15-E. 使用0.01M DTT 區(qū)分IgM 和IgG 抗體 / 472
15-F. 使用2-ME 區(qū)分IgM 和IgG 抗體 / 475
15-G. 使用酶聯(lián)抗球蛋白試驗(yàn)做劑量研究 / 478
15-H. 使用單核細(xì)胞單層試驗(yàn)預(yù)測臨床意義 / 481
15-I. 篩查PNH：蔗糖溶血試驗(yàn) / 484
15-J. 將血漿轉(zhuǎn)化為血清 / 486
15-K. 從外周血中分離基因組DNA / 488
15-L. 使用熱啟動(dòng)Taq PCR 擴(kuò)增基因組DNA / 490
15-M. 制備瓊脂糖凝膠和電泳分析PCR 產(chǎn)物 / 493
附錄/ 495
附錄A. 試劑制備和儲(chǔ)存/ 496
附錄B. 試劑制備存檔表 / 515
國際亞太血型與基因組學(xué)協(xié)會(huì)簡介/ 516
縮寫詞/ 517
索引/ 521
讀者反饋/ 534
圖8-A-1. 調(diào)查意外抗體時(shí)的注意事項(xiàng) / 226
圖8-A-2. 調(diào)查自身對照陽性血液樣品時(shí)的注意事項(xiàng) / 227
圖8-C-1. 在每個(gè)單獨(dú)的譜細(xì)胞上劃掉的抗原 / 235
圖8-C-2. 在抗原譜表的頂部劃掉的抗原 / 235
圖9-1. 高頻率抗原抗體的研究（敏感性見表9-2） / 265
圖10-B-1. Rh 免疫球蛋白給藥流程圖 / 286
圖13-1. 調(diào)查ABO 定型不一致流程圖 / 411
表1-D-1. 抗-D 直接和間接試驗(yàn)的解釋建議 / 15
表1-F-1. 血清學(xué)反應(yīng)分級 / 20
表8-A-1. 某些紅細(xì)胞抗原同種抗體的血清學(xué)特征 / 228
表8-E-1. 選擇抗原陰性的血液輸血：常見抗體的一些實(shí)例 / 240
表8-F-1. 概率值 / 243
表8-J-1. 血型物質(zhì)的抗體抑制作用/ 251
表9-1. 木瓜蛋白酶/ 無花果蛋白酶和硫醇試劑對高頻率紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)的影響 / 262
表9-2. 酶和化學(xué)品對抗體與高頻率紅細(xì)胞抗原反應(yīng)的影響 / 263
表11-1. 冷反應(yīng)性自身抗體的特異性：與未處理的O、I 紅細(xì)胞的反應(yīng)比較 / 317
表12-1. 報(bào)告引起免疫性溶血和DAT 陽性的藥物 / 376
表13-1. ABO 定型不一致的原因 / 409
表13-2. 一些異常或不尋常的ABO 定型結(jié)果 / 410
表14-1. 多凝集性紅細(xì)胞與外源凝集素的反應(yīng) / 441
表15-A-1. 酸溶血試驗(yàn)程序 / 464
表15-E-1. 用2-ME 或DTT 研究確定免疫球蛋白抗體類別的解讀 / 474
附錄6-1. Sephadex 凝膠珠：背景信息 / 189
附錄6-2. 凝膠柱中的凝集反應(yīng) / 190
圖、表和章附錄
附錄6-3. 微孔板試驗(yàn)：一般注意事項(xiàng) / 191
附錄6-4. 毛細(xì)管方法：一般注意事項(xiàng) / 193
附錄8-1. 評估抗體鑒定譜細(xì)胞初始結(jié)果 / 258
附錄8-2. 鑒定/ 確認(rèn)抗體特異性的方法 / 259
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