本書內(nèi)容主要基于作者團隊建立的多種用于抗真菌藥物篩選和活性評價的醫(yī)學(xué)真菌生物實驗標(biāo)準(zhǔn)操作方法，旨在為真菌藥物研發(fā)提供參考依據(jù)。主要內(nèi)容分為四篇：第1篇，體外抗真菌活性篩選常用方法；第2篇，抗真菌作用機制研究常用方法；第3篇，真菌感染動物模型建立及體內(nèi)抗真菌活性評價；第4篇，常用的真菌分子生物學(xué)實驗及應(yīng)用舉例。
本書可為真菌相關(guān)研究的科研工作者提供標(biāo)準(zhǔn)和參考。
劉娜，海軍軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)系副教授、碩士研究生導(dǎo)師，研究方向為抗真菌藥物研究，主要聚焦于抗真菌新靶點、新機制和新分子骨架發(fā)現(xiàn)。作為項目負(fù)責(zé)人主持國家自然科學(xué)基金面上項目（2項）、青年基金、軍隊生物安全研究專項等6項研究課題；作為項目骨干參與國家杰出青年科學(xué)基金、國家重點研發(fā)計劃、上海市教委科技創(chuàng)新重大項目、上海市優(yōu)秀學(xué)術(shù)帶頭人等項目。發(fā)表SCI論文27篇，獲授權(quán)發(fā)明專利17項，參編中英文專著6部。作為主要完成人獲得上海市科技進步二等獎，入選海軍軍醫(yī)大學(xué)遠(yuǎn)航人才計劃和A級優(yōu)秀教員，擔(dān)任《中南藥學(xué)》雜志編委。
第1篇 體外抗真菌活性篩選常用方法 001
1 體外抗真菌活性測試 002
2 體外協(xié)同抗真菌活性測試 006
3 馬拉色菌的體外抗真菌活性測試 010
第2篇 抗真菌作用機制研究常用方法 013
4 真菌與腫瘤細(xì)胞互作實驗 014
5 平皿/紙片擴散實驗 017
6 時間-生長曲線測試 020
7 時間-殺菌曲線測試 023
8 生物被膜形成抑制實驗 026
9 成熟生物被膜清除實驗 029
10 菌絲生長抑制實驗 033
11 尿素酶生成抑制實驗 036
12 黑素抑制實驗 039
13 莢膜生長抑制實驗 042
14 莢膜多糖含量測定實驗 045
15 真菌細(xì)胞表面疏水性測試 048
16 透射電子顯微鏡實驗 051
17 真菌細(xì)胞共定位成像 054
18 真菌活細(xì)胞激光共聚焦實時成像 057
19 甾醇含量測定實驗 060
20 細(xì)胞周期實驗 063
21 細(xì)胞凋亡實驗 066
第3篇 真菌感染動物模型建立及體內(nèi)抗真菌活性評價 069
22 小鼠系統(tǒng)性念珠菌感染模型 070
23 小鼠隱球菌性腦膜炎模型 073
24 小鼠皮膚感染模型 077
25 小鼠陰道炎感染模型 080
26 大蠟螟幼蟲模型 084
27 線蟲實驗 087
28 血腦屏障透過實驗 090
第4篇 常用的真菌分子生物學(xué)實驗及應(yīng)用舉例 093
29 基因敲除技術(shù) 094
30 實時RT-PCR 實驗 100
31 Western blot 實驗 103
32 Hsp90 抑酶活性測試 106
33 HDAC 抑酶活性測試 110
34 組蛋白去甲基化酶抑酶活性測試 113
附錄 121
附錄1 常見病原真菌及其活化、凍存方法 122
附錄2 常用培養(yǎng)基及緩沖溶液的配制方法 127
附錄3 實驗相關(guān)儀器 131
附錄4 縮略語表 132
參考文獻(xiàn) 134
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