本書通過體內(nèi)實驗為主、體外實驗為輔的方式介紹口腔硬組織及骨相關(guān)硬組織常用的實驗方法。主要內(nèi)容包括實驗動物建模、標(biāo)本取材處理、組織學(xué)及分子生物學(xué)實驗、硬組織相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)及相關(guān)科研試劑配置等實驗技術(shù)及方法。同時,列舉出口腔硬組織研究人員在科研過程中可能遇到的實驗問題,并且給讀者呈現(xiàn)相應(yīng)的具體的解決辦法。本書以通俗易懂的文字詳盡敘述了每種實驗操作技術(shù)流程,其中并附以清晰的實驗圖片供廣大研究人員參考,旨在為讀者提供詳細(xì)準(zhǔn)確的實驗操作流程,具有極強的實用性。
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中華口腔醫(yī)學(xué)會口腔病理學(xué)專業(yè)委員會常委,主持國家自然科學(xué)基金面上項目、青年項目、博士后科學(xué)基金特別資助項目等10項。
目錄
第一章 口腔疾病動物模型建立方法 1
第一節(jié) 牙體牙髓疾病動物模型的建立方法 1
第二節(jié) 牙周炎動物模型的建立方法 10
第三節(jié) 顳下頜關(guān)節(jié)紊亂動物模型的建立方法 13
第二章 實驗動物麻醉與標(biāo)本取材 17
第一節(jié) 取材前準(zhǔn)備 17
第二節(jié) 口腔標(biāo)本取材 24
第三節(jié) 取材前灌流固定的方法 27
第四節(jié) 原位雜交實驗標(biāo)本取材 29
第五節(jié) 組織學(xué)及組織化學(xué)實驗標(biāo)本取材 31
第六節(jié) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗標(biāo)本取材 32
第七節(jié) Western blot實驗標(biāo)本取材 33
第三章 實驗動物口腔標(biāo)本處理 36
第一節(jié) 組織標(biāo)本固定 36
第二節(jié) 標(biāo)本脫鈣 37
第三節(jié) 標(biāo)本包埋 41
第四章 組織切片制作 59
第一節(jié) 石蠟切片制作 59
第二節(jié) 冰凍切片制作 65
第三節(jié) 超薄切片制作 70
第四節(jié) 硬組織切片制作 75
第五章 組織學(xué)和組織化學(xué)實驗操作流程 83
第一節(jié) 組織學(xué)實驗操作流程 83
第二節(jié) 組織化學(xué)實驗操作流程 85
第三節(jié) 免疫組織化學(xué)實驗操作流程 90
第四節(jié) 熒光染色實驗操作流程 95
第五節(jié) 復(fù)染操作流程 100
第六章 特殊染色 103
第一節(jié) 軟骨-骨組織特殊染色 103
第二節(jié) 膠原組織特殊染色 109
第三節(jié) 骨組織染色 113
第四節(jié) 蛋白質(zhì)特殊染色:Stains All染色 119
第五節(jié) X-Gal染色 121
第六節(jié) 雙熒光標(biāo)記 123
第七章 口腔硬組織X線、Micro-CT及掃描電子顯微鏡成像 126
第一節(jié) X線成像 126
第二節(jié) Micro-CT成像 128
第三節(jié) 掃描電子顯微鏡成像 130
第八章 蛋白質(zhì)提取及Western blot操作流程 138
第一節(jié) 組織及細(xì)胞蛋白質(zhì)提取 138
第二節(jié) Western blot操作流程 145
第九章 DNA/RNA提取、PCR及原位雜交操作流程 159
第一節(jié) DNA/RNA提取及鑒定操作流程 159
第二節(jié) PCR操作流程 171
第三節(jié) 原位雜交操作流程 179
第十章 口腔硬組織相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng) 190
第一節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)概述 190
第二節(jié) 成牙本質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng) 201
第三節(jié) 成釉細(xì)胞培養(yǎng) 202
第四節(jié) 成骨細(xì)胞培養(yǎng) 203
第五節(jié) 牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng) 204
第六節(jié) 牙髓干細(xì)胞培養(yǎng) 206
彩插