目錄
第一章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ) 1
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度 1
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室的基本組成及使用 4
第二章 常用生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 9
第一節(jié) 生物大分子的制備 9
第二節(jié) 層析技術(shù) 19
第三節(jié) 電泳技術(shù) 32
第四節(jié) 離心技術(shù) 38
第五節(jié) 分光光度技術(shù) 40
第六節(jié) PCR技術(shù) 41
第七節(jié) 分子雜交和印跡技術(shù) 51
第八節(jié) 基因克隆技術(shù) 56
第九節(jié) 生物大分子相互作用技術(shù) 65
第十節(jié) 基因編輯技術(shù) 66
第十一節(jié) RNA干擾技術(shù) 75
第三章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)基本實(shí)驗(yàn) 79
實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測(cè)定 79
實(shí)驗(yàn)二 血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳 80
實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)的定量分析 81
實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)的變性與沉淀反應(yīng) 86
實(shí)驗(yàn)五 凝膠過濾層析法分離蛋白質(zhì)（血紅蛋白與魚精蛋白的分離） 88
實(shí)驗(yàn)六 氨基酸的分離與鑒定——層析法 90
實(shí)驗(yàn)七 組織核酸的提取 92
實(shí)驗(yàn)八 核酸水解及組分鑒定 93
實(shí)驗(yàn)九 核酸含量的測(cè)定 94
實(shí)驗(yàn)十 維生素C的定量測(cè)定 96
實(shí)驗(yàn)十一 胡蘿卜素的層析分離 97
實(shí)驗(yàn)十二 酶的特異性 99
實(shí)驗(yàn)十三 影響酶作用的因素 100
實(shí)驗(yàn)十四 尿淀粉酶活性的測(cè)定（Winslow法） 102
實(shí)驗(yàn)十五 米氏常數(shù)的測(cè)定 103
實(shí)驗(yàn)十六 琥珀酸脫氫酶的作用及其抑制 105
實(shí)驗(yàn)十七 飽食、饑餓對(duì)肝糖原含量的影響 106
實(shí)驗(yàn)十八 腎上腺素、胰島素對(duì)血糖濃度的影響 107
實(shí)驗(yàn)十九 運(yùn)動(dòng)對(duì)尿中乳酸含量的影響 108
實(shí)驗(yàn)二十 血漿脂蛋白電泳 109
實(shí)驗(yàn)二十一 脂肪酸的β氧化 110
實(shí)驗(yàn)二十二 血清總膽固醇測(cè)定 111
實(shí)驗(yàn)二十三 乳酸脫氫酶及其輔酶的作用 112
實(shí)驗(yàn)二十四 氰化物中毒機(jī)制及細(xì)胞色素c氧化酶的作用 114
實(shí)驗(yàn)二十五 過氧化氫酶的定性反應(yīng) 115
實(shí)驗(yàn)二十六 胃蛋白酶對(duì)蛋白質(zhì)的消化作用 115
實(shí)驗(yàn)二十七 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（SGPT）活性測(cè)定 116
實(shí)驗(yàn)二十八 氨基酸的生酮作用 118
實(shí)驗(yàn)二十九 尿素的生成 119
實(shí)驗(yàn)三十 血清尿素氮測(cè)定 120
實(shí)驗(yàn)三十一 血液中非蛋白氮的測(cè)定 121
實(shí)驗(yàn)三十二 血紅蛋白電泳 122
實(shí)驗(yàn)三十三 血漿的緩沖作用 123
實(shí)驗(yàn)三十四 血漿二氧化碳結(jié)合力的測(cè)定（滴定法） 124
實(shí)驗(yàn)三十五 血清鈣的測(cè)定 125
實(shí)驗(yàn)三十六 血清無機(jī)磷的測(cè)定 126
實(shí)驗(yàn)三十七 動(dòng)物肝DNA的提�。�濃鹽法） 127
實(shí)驗(yàn)三十八 外周血基因組DNA的提取 128
實(shí)驗(yàn)三十九 組織或細(xì)胞RNA的抽提 129
實(shí)驗(yàn)四十 基因工程中重組DNA的構(gòu)建 129
實(shí)驗(yàn)四十一 感受態(tài)細(xì)胞的制備和質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化 131
實(shí)驗(yàn)四十二 質(zhì)粒DNA小量提取及酶切鑒定 132
實(shí)驗(yàn)四十三 克隆化基因在大腸桿菌中的表達(dá) 134
實(shí)驗(yàn)四十四 PCR擴(kuò)增和瓊脂糖電泳檢測(cè) 135
實(shí)驗(yàn)四十五 蛋白質(zhì)SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 138
第四章 生物化學(xué)與分子生物學(xué)綜合性實(shí)驗(yàn) 142
實(shí)驗(yàn)一 多糖的分離純化、分子修飾及生物活性的研究 142
實(shí)驗(yàn)二 蘆薈多糖的提取及其抗氧化性的研究 144
實(shí)驗(yàn)三 免疫共沉淀證明 E-cadherin 與 p120-catenin 的相互作用 146
實(shí)驗(yàn)四 GST pull-down驗(yàn)證FRMD5與intergrinβ1的相互作用 147
實(shí)驗(yàn)五 ChIP 實(shí)驗(yàn)證實(shí)c-myc對(duì)cyclinD1的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 149
實(shí)驗(yàn)六 siRNA靶向敲低EGFR的表達(dá) 151
實(shí)驗(yàn)七 CRISPR/Cas9敲除細(xì)胞NEDD1表達(dá) 153
實(shí)驗(yàn)八 蛋白質(zhì)印跡分析 156
附錄1 試劑配制法 161
附錄2 試劑配制注意事項(xiàng) 165
附錄3 實(shí)驗(yàn)室常用數(shù)據(jù)參考表 173
參考文獻(xiàn) 178