《植物生理學實驗技術(shù)教程》包括植物生理學的主要研究內(nèi)容。分為細胞生理和細胞信號轉(zhuǎn)導、水分生理和礦質(zhì)營養(yǎng)、光合作用和呼吸代謝、植物激素和次生物質(zhì)、植物生長發(fā)育調(diào)控、植物逆境生理等幾部分。每部分較全面介紹相關(guān)研究技術(shù)和擴展知識;列出的實驗既有基本常用的實驗,又有較新的、重要的研究技術(shù),部分實驗提出研究思路,有學生自主設(shè)計的空間,啟迪學生創(chuàng)新性,體現(xiàn)了植物生理學教學、研究工作的特色。實驗介紹有詳有略;每個實驗都提出討論的問題;附主要的原始參考文獻。書后還列出緩沖液、計量單位等附錄表;插入了主要儀器裝置和重要實驗結(jié)果的彩圖。
《植物生理學實驗技術(shù)教程》既適于生物科學、農(nóng)業(yè)科學本科生使用,也適于植物相關(guān)專業(yè)研究生參考。全書由中國農(nóng)業(yè)大學生物學院植物科學系老師參加編寫。
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目錄
圖版
前言
第一部分 植物細胞生理和細胞信號轉(zhuǎn)導
1 植物細胞的活體染色與細胞死活鑒定 3
2 植物組織(細胞)化學染色技術(shù) 6
2.1 核酸的組織化學鑒定 7
2.1.1 孚爾根法鑒定DNA 7
2.1.2 甲基綠-派羅寧法鑒定DNA、RNA 9
2.2 酶的組織化學鑒定 9
2.2.1 多酚氧化酶染色法 9
2.2.2 細胞色素氧化酶染色法 11
2.2.3 酸性磷酸酯酶染色法 12
2.2.4 三磷酸腺苷酶染色法 13
2.2.5 轉(zhuǎn)基因植物的β-葡萄糖苷酸酶(GUS)活性的組織化學鑒定 14
3 植物細胞熒光檢測技術(shù) 16
3.1 植物肌動蛋白細胞骨架的熒光標記 17
3.2 植物微管蛋白的免疫熒光染色 18
3.3 細胞核的熒光標記 19
3.4 顯微注射熒光探針法研究植物細胞間的共質(zhì)體通訊 21
4 植物活細胞中自由鈣的檢測 23
4.1 氣孔保衛(wèi)細胞中游離鈣濃度的測定 25
4.2 植物花粉管胞質(zhì)游離鈣濃度的測定 26
5 熒光探針法測定植物細胞內(nèi)pH的變化 28
參考文獻 30
第二部分 植物水分生理和礦質(zhì)營養(yǎng)
6 壓力室法測定植物組織水勢 33
7 溶液滲透濃度測定儀測定植物組織滲透勢的方法 37
8 用CB-1301型穩(wěn)態(tài)氣孔計測定葉片蒸騰速率和氣孔導度 40
9 植物葉片氣孔運動的調(diào)節(jié) 43
10 植物的溶液培養(yǎng)及缺素診斷 45
11 植物根系活力的測定(TTC法) 50
12 硝酸還原酶活性測定 52
13 H+-ATPase活性測定 54
13.1 質(zhì)膜H+-ATPase活性的測定 54
13.2 液泡膜H+-ATPase活性的測定 56
14 原子吸收光譜測定植物中K+含量 59
15 測定植物全細胞跨膜鉀離子流的膜片鉗技術(shù) 61
參考文獻 66
第三部分 植物的光合作用和呼吸代謝
16 葉綠體色素的提取和定量分析 69
17 紅外線CO2儀測定葉片的光合速率、呼吸速率以及CO2補償點 73
18 氧電極法測定葉片組織和分離葉綠體的光合速率和呼吸速率 78
18.1 綠色植物葉片組織的光合放氧速率和呼吸速率測定 81
18.2 分離葉綠體的光合放氧速率測定 83
19 離體葉綠體的光還原反應(yīng) 87
20 離體線粒體的氧化作用和磷酸化作用 89
21 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)羧化活性的測定 93
21.1 分光光度法 93
21.2 同位素法 95
22 PEP羧化酶活性的測定 97
參考文獻 100
第四部分 植物激素和次生物質(zhì)檢測
23 植物激素提取和分析常識 103
24 植物細胞分裂素類物質(zhì)的分離提取 106
25 HPLC-ELISA法測定細胞分裂素 109
26 植物激素乙烯的氣相色譜法測定 113
27 ABA免疫組織化學定位模型實驗 116
28 生長素的生理效應(yīng)及生物鑒定法 121
28.1 用芽鞘伸長法測定生長素類物質(zhì)的濃度和效價 121
28.2 用綠豆根形成法測定生長素類物質(zhì)的濃度或效價 122
29 赤霉素的生物測定 125
30 赤霉素對α-淀粉酶的誘導形成 129
31 細胞分裂素對菜豆葉片生長和衰老的效應(yīng) 131
32 生長素和乙烯對葉片脫落的效應(yīng) 134
33 分光光度法測定煙堿含量 136
33.1 紫外分光光度法 137
33.2 萃取分光光度法 139
參考文獻 141
第五部分 植物生長發(fā)育及其調(diào)控
34 葉片培養(yǎng)——植物組織培養(yǎng)中的脫分化與再分化過程 145
35 植物細胞薄層培養(yǎng) 149
36 植物細胞懸浮培養(yǎng) 152
37 擬南芥葉肉細胞原生質(zhì)體的分離、培養(yǎng)及應(yīng)用 155
38 擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化——浸蘸法 160
39 日本牽牛開花的光周期誘導與成花信號轉(zhuǎn)移 165
40 植物成花刺激物的傳遞 167
41 花粉萌發(fā)和花粉活力的測定 169
41.1 花粉萌發(fā)的測定 169
41.2 花粉活力的測定 170
41.2.1 TTC顯色法 170
41.2.2 I2-KI染色測定法 171
41.2.3 過氧化物酶法 171
42 種子生活力測定 173
42.1 溴麝香草酚藍(BTB)法 173
42.2 氯化三苯基四氮唑(TTC)法 174
42.3 紅墨水染色法 175
42.4 熒光法 175
43 種子萌發(fā)的調(diào)控 177
43.1 光質(zhì)對種子萌發(fā)的影響 177
43.2 外源植物激素對種子萌發(fā)的影響 178
44 擬南芥發(fā)育缺陷突變體mt50 的表型觀察 180
參考文獻 183
第六部分 植物逆境生理
45 植物游離脯氨酸含量的測定 187
46 甜菜堿含量測定 189
47 植物保護酶(SOD,POD,CAT)活性測定 191
47.1 SOD活性測定——NBT法 191
47.2 過氧化氫酶活性的測定 193
47.3 過氧化物酶活性的測定 194
48 H2O2含量的測定和組化定位檢測 197
48.1 H2O2含量的測定 197
48.1.1 分光光度計法 197
48.1.2 熒光分光光度計法 198
48.2 過氧化氫組化定位檢測——DAB染色法 199
49 植物組織中丙二醛含量測定 201
50 電導儀法測定植物細胞質(zhì)膜透性 203
51 鹽脅迫對擬南芥鹽敏感突變體生長的影響 205
52 RD29A--US 轉(zhuǎn)基因植物在非生物脅迫下的基因表達分析 210
53 植物組織電阻和電位的測定 213
參考文獻 216
附錄 217
一、取樣及植物材料處理的原則 217
二、計量單位 218
三、常用緩沖液 220
四、常用植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)主要性質(zhì) 226
五、組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基配方 227
參考文獻 230