生物技術(shù)、生物工程綜合實(shí)驗(yàn)指南(邱業(yè)先)
《生物技術(shù)、生物工程綜合實(shí)驗(yàn)指南》是生物技術(shù)、生物工程專業(yè)在四年級(jí)上學(xué)期開設(shè)的一門的專業(yè)必修綜合性實(shí)驗(yàn)課程。
《生物技術(shù)、生物工程綜合實(shí)驗(yàn)指南》由16章內(nèi)容組成，主要包括細(xì)胞工程（植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)）、微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)、發(fā)酵工程、酶工程、基因工程、生物分離工程、食品生物技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、生物芯片技術(shù)和生物信息學(xué)基礎(chǔ)等內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容基本覆蓋了生物技術(shù)的上中下游的全過(guò)程，各個(gè)實(shí)驗(yàn)（模塊）既是獨(dú)立的，內(nèi)容上又是聯(lián)系的。
邱業(yè)先，蘇州科技學(xué)院化學(xué)與生物工程學(xué)院，院長(zhǎng) 教授，(包括教學(xué)、科研、設(shè)計(jì)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)、管理等方面，重點(diǎn)說(shuō)明相關(guān)教學(xué)經(jīng)歷及取得的成績(jī)。)
主要從事酶學(xué)及生物技術(shù)、生物工程等方面的教學(xué)研究工作。主講過(guò)本科和研究生的生物化學(xué)、分子生物學(xué)等課程，先后主持三項(xiàng)國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目和省部級(jí)項(xiàng)目十余項(xiàng)。曾獲省科技進(jìn)步2等獎(jiǎng)一項(xiàng)，3等獎(jiǎng)一項(xiàng)。先后在有關(guān)刊物發(fā)表學(xué)術(shù)論文90余篇。編寫全國(guó)統(tǒng)編本科教材5本。曾任江西省跨世紀(jì)學(xué)科帶頭人，江西省生化學(xué)會(huì)副理事長(zhǎng)，江西省政府學(xué)位委員會(huì)委員。1996年獲國(guó)務(wù)院特殊津貼，2001年獲江西省優(yōu)秀教師。先后招收碩士研究生25名（16名已畢業(yè)），博士研究生4名（1名已畢業(yè)）。
第一章植物細(xì)胞工程技術(shù)1
實(shí)驗(yàn)一植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基的配制及滅菌1
實(shí)驗(yàn)二植物組織快速繁殖技術(shù)——以脫毒快繁為例2
實(shí)驗(yàn)三植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)3
實(shí)驗(yàn)四聚乙二醇誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合5
實(shí)驗(yàn)五農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化8
第二章動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)11
實(shí)驗(yàn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的配制與細(xì)胞計(jì)數(shù)11
實(shí)驗(yàn)二動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)——鼠成纖維細(xì)胞的分離與永生化13
實(shí)驗(yàn)三動(dòng)物細(xì)胞繼代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇15
實(shí)驗(yàn)四細(xì)胞系培養(yǎng)18
實(shí)驗(yàn)五外源基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中的表達(dá)20
第三章微生物技術(shù)23
實(shí)驗(yàn)一水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定23
實(shí)驗(yàn)二多管發(fā)酵法測(cè)定水中大腸菌群25 第一章植物細(xì)胞工程技術(shù)1
實(shí)驗(yàn)一植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基的配制及滅菌1
實(shí)驗(yàn)二植物組織快速繁殖技術(shù)——以脫毒快繁為例2
實(shí)驗(yàn)三植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)3
實(shí)驗(yàn)四聚乙二醇誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合5
實(shí)驗(yàn)五農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化8
第二章動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)11
實(shí)驗(yàn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基的配制與細(xì)胞計(jì)數(shù)11
實(shí)驗(yàn)二動(dòng)物細(xì)胞原代培養(yǎng)——鼠成纖維細(xì)胞的分離與永生化13
實(shí)驗(yàn)三動(dòng)物細(xì)胞繼代培養(yǎng)、凍存和復(fù)蘇15
實(shí)驗(yàn)四細(xì)胞系培養(yǎng)18
實(shí)驗(yàn)五外源基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中的表達(dá)20
第三章微生物技術(shù)23
實(shí)驗(yàn)一水中細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定23
實(shí)驗(yàn)二多管發(fā)酵法測(cè)定水中大腸菌群25
實(shí)驗(yàn)三廢水硝化?反硝化生物脫氮31
實(shí)驗(yàn)四微生物吸附法去除重金屬34
實(shí)驗(yàn)五有機(jī)污染物的微生物降解35
第四章基因工程技術(shù)39
實(shí)驗(yàn)一菌液培養(yǎng)和質(zhì)粒提取39
實(shí)驗(yàn)二瓊脂糖凝膠電泳42
實(shí)驗(yàn)三PCR擴(kuò)增目的基因43
實(shí)驗(yàn)四從PCR產(chǎn)物中回收目的DNA片段45
實(shí)驗(yàn)五目的基因片段與載體連接（TA克�。�46
實(shí)驗(yàn)六感受態(tài)菌的制備47
實(shí)驗(yàn)七細(xì)菌轉(zhuǎn)化49
實(shí)驗(yàn)八重組子的篩選與酶切鑒定50
第五章分子生物學(xué)應(yīng)用技術(shù)54
實(shí)驗(yàn)一Southern雜交54
實(shí)驗(yàn)二Northern雜交56
實(shí)驗(yàn)三Western印跡59
實(shí)驗(yàn)四PCR引物設(shè)計(jì)63
實(shí)驗(yàn)五隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性技術(shù)（RAPD）64
實(shí)驗(yàn)六限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù) (RFLP)65
實(shí)驗(yàn)七擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性技術(shù)（AFLP）67
實(shí)驗(yàn)八簡(jiǎn)單序列重復(fù)技術(shù)（SSR）70
第六章蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)74
實(shí)驗(yàn)一等電聚焦電泳74
實(shí)驗(yàn)二SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳78
實(shí)驗(yàn)三磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)——32P放射性標(biāo)記檢測(cè)80
實(shí)驗(yàn)四磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)——PRO?Q Diamond染色法82
實(shí)驗(yàn)五定量蛋白質(zhì)組學(xué)——蛋白質(zhì)同位素標(biāo)記83
實(shí)驗(yàn)六定量蛋白質(zhì)組學(xué)——熒光標(biāo)記86
第七章生物芯片技術(shù)89
實(shí)驗(yàn)一基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)肺癌A549細(xì)胞89
實(shí)驗(yàn)二蛋白質(zhì)芯片檢測(cè)人肺癌A549細(xì)胞中細(xì)胞因子表達(dá)92
實(shí)驗(yàn)三組織芯片技術(shù)94
第八章發(fā)酵工程技術(shù)96
實(shí)驗(yàn)一發(fā)酵過(guò)程中微生物的菌體量與菌體密度及發(fā)酵液黏度測(cè)定96
實(shí)驗(yàn)二發(fā)酵過(guò)程中溶解氧的控制與測(cè)定99
實(shí)驗(yàn)三林可霉素發(fā)酵過(guò)程工藝控制103
實(shí)驗(yàn)四L?谷氨酸的發(fā)酵與提取108
實(shí)驗(yàn)五生物油脂發(fā)酵過(guò)程工藝控制111
第九章食品生物技術(shù)116
實(shí)驗(yàn)一葡萄酒釀造116
實(shí)驗(yàn)二酸奶釀造及乳酸快速測(cè)定117
實(shí)驗(yàn)三平菇生產(chǎn)技術(shù)119
第十章酶的分離提取與純化技術(shù)121
實(shí)驗(yàn)一槭樹葉蛋白酶活力測(cè)定121
實(shí)驗(yàn)二槭樹葉蛋白酶分離純化123
實(shí)驗(yàn)三槭樹葉蛋白酶的氨基酸組成124
實(shí)驗(yàn)四槭樹葉蛋白酶動(dòng)力學(xué)126
實(shí)驗(yàn)五槭樹葉蛋白酶抑制作用動(dòng)力學(xué)127
第十一章酶固定化技術(shù)131
實(shí)驗(yàn)一固定化酵母乙醇發(fā)酵131
實(shí)驗(yàn)二固定化葡萄糖異構(gòu)酶生產(chǎn)果葡糖漿134
實(shí)驗(yàn)三β?半乳糖苷酶的固定化及應(yīng)用136
第十二章生物分離技術(shù)140
實(shí)驗(yàn)一銀杏葉總黃酮提取、分離與初步鑒定140
實(shí)驗(yàn)二溶菌酶的提取、分離純化及其活性測(cè)定145
實(shí)驗(yàn)三超臨界萃取薄荷揮發(fā)油151
實(shí)驗(yàn)四荷葉生物堿提取與分離純化153
實(shí)驗(yàn)五平菇多糖提取與分離純化156
第十三章生物信息學(xué)基礎(chǔ)159
實(shí)驗(yàn)一基因和基因組數(shù)據(jù)庫(kù)159
實(shí)驗(yàn)二蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)160
實(shí)驗(yàn)三同源性搜索163
實(shí)驗(yàn)四分子系統(tǒng)發(fā)生分析164
附錄167
附錄一法定計(jì)量單位和單位換算167
附錄二常見緩沖液配制168
附錄三離心機(jī)轉(zhuǎn)速與相對(duì)離心力換算170
附錄四色譜法常用數(shù)據(jù)173
附錄五常用電泳緩沖液及凝膠加樣緩沖液176
附錄六植物組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基配方177
附錄七常見市售酸堿濃度178
附錄八主要的限制性核酸內(nèi)切酶作用位點(diǎn)及切割形成DNA片段的平均大小179
附錄九幾種主要的質(zhì)粒載體酶切位點(diǎn)及選擇標(biāo)記180
附錄十常見元素的相對(duì)原子質(zhì)量表185
附錄十一化學(xué)試劑規(guī)格186
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